多孔聚GMA-DVB的制備及其對(duì)米曲霉β-半乳糖苷酶的固定化研究.pdf

1、以甲基丙烯酸縮水甘油酯（GMA）為單體，二乙烯基苯（DVB)為交聯(lián)劑，十二醇和環(huán)己醇為液體致孔劑，納米碳酸鈣為固體致孔劑，采用懸浮聚合法，分別利用單純液相致孔和固液雙致孔的方式制備了甲基丙烯酸縮水甘油酯-二乙烯基苯共聚物微球，并將其用于固定化β-半乳糖苷酶。通過(guò)實(shí)驗(yàn)摸索了甲基丙烯酸縮水甘油酯與二乙烯基苯的摩爾用量比，固定化酶的最適時(shí)間、pH值以及最適酶濃度。在最佳固定化條件下，分別測(cè)定了單純液相致孔劑載體固定化酶和固液雙致孔劑載體固定化

2、酶的基本化學(xué)性質(zhì)，如固定化酶的酶促反應(yīng)最適溫度、最適pH，固定化酶的熱穩(wěn)定性、操作穩(wěn)定性和酸堿穩(wěn)定性以及動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并且與自由酶的基本性質(zhì)進(jìn)行了比對(duì)。結(jié)果表明：采用固液雙致孔的方法制備的載體固定β-半乳糖苷酶，其酶活力的回收率達(dá)到了80.35％，在單位載體上的酶活力為540.01U/g干燥載體，要遠(yuǎn)高于采用單純液相致孔得到的固定化酶的酶活力。
　　采用懸浮聚合和共沉淀的方法，在FeCl3和FeCl2的作用下，以十二醇和環(huán)己醇為致孔

3、劑，制備了磁性GMA-DVB高分子聚合物微球載體。利用電子顯微鏡掃描小球，可以看到磁性小球表面具有很明顯的孔結(jié)構(gòu)，此結(jié)構(gòu)有利于酶的固定化，而X-射線能譜圖和磁天平的測(cè)量都驗(yàn)證了小球的磁性。將磁性小球載體用于固定β-半乳糖苷酶，并與非磁性固定化酶的熱穩(wěn)定性、酸堿穩(wěn)定性、操作穩(wěn)定性和米氏常數(shù)等進(jìn)行了比較。結(jié)果表明，磁性聚合物載體固定化酶與非磁性聚合物載體固定化酶的動(dòng)力學(xué)性質(zhì)相似，但是由于磁性聚合物載體固定化酶具有磁響應(yīng)性，可以方便且快速的進(jìn)