中醫(yī)藥調(diào)節(jié)慢性肝病腸道微生態(tài)的文獻(xiàn)分析及臨床研究.pdf

1、研究目的：
　　本論文主要分為兩個(gè)相關(guān)聯(lián)的部分，第一部分為中醫(yī)藥調(diào)節(jié)慢性肝病腸道微生態(tài)的文獻(xiàn)分析，第二部分為中藥復(fù)方地五養(yǎng)肝聯(lián)合恩替卡韋對(duì)慢性乙型肝炎患者腸肝相關(guān)免疫及腸道菌群的影響。
　　中醫(yī)藥治療慢性肝病的現(xiàn)代文獻(xiàn)很多，但是中醫(yī)藥通過調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)治療慢性肝病的文獻(xiàn)不是很多，缺乏系統(tǒng)性的總結(jié)。第一部分研究旨在通過查閱近15年中醫(yī)臨床和動(dòng)物試驗(yàn)文獻(xiàn)資料的基礎(chǔ)上，分析、歸納、總結(jié)中醫(yī)藥調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)治療慢性肝病的規(guī)律，為臨床

2、治療和科學(xué)研究提供一定理論依據(jù)。
　　第二部分研究主要為觀察“扶正祛邪”法之地五養(yǎng)肝加味方聯(lián)合恩替卡韋治療慢性乙型肝炎患者的臨床療效，及中西醫(yī)結(jié)合治療對(duì)中醫(yī)臨床證候、腸肝相關(guān)免疫、血漿內(nèi)毒素水平和腸道菌群的影響。并通過觀察不良事件的發(fā)生率，評(píng)價(jià)本方案的安全性。
　　研究方法與結(jié)果：
　　1、中醫(yī)藥調(diào)節(jié)慢性肝病腸道微生態(tài)的文獻(xiàn)分析
　　1.1方法：
　　搜索CNKI中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫、萬方數(shù)據(jù)資源系統(tǒng)中199

3、9年1月至2015年9月的相關(guān)文獻(xiàn)。閱讀文獻(xiàn)題目及摘要，經(jīng)過篩選后，剔除其中含有文獻(xiàn)綜述、護(hù)理、理論探討及重復(fù)的文獻(xiàn)報(bào)道。使用Excel2010表格對(duì)文獻(xiàn)中使用中藥的情況進(jìn)行統(tǒng)計(jì)和分析，得出中藥的使用頻次及頻率，中藥的分類及性味歸經(jīng)概率。
　　1.2結(jié)果：
　　1.2.1共選出符合標(biāo)準(zhǔn)的文獻(xiàn)64篇，包含7類病種，50個(gè)中藥復(fù)方，13個(gè)中成藥方，126種中藥材。
　　1.2.2所有中藥共出現(xiàn)502次，中藥頻次最大的為36

4、次，最小的為1次。排名前十位的是：大黃、赤芍、丹參、枳實(shí)、厚樸、茵陳、白術(shù)、茯苓、黃芪、生甘草。126種中藥材在《中藥學(xué)》中都有記載，共涵蓋中藥材中的17個(gè)大分類，34個(gè)小分類。排名前五位的是：補(bǔ)虛藥、清熱藥、利水滲濕藥、活血化瘀藥、理氣藥。
　　1.2.3126種中藥，四氣以寒性第一，五味以苦味第一，歸經(jīng)以肝經(jīng)第一。
　　1.2.4七類病種中以重型肝炎第一，肝硬化第二，脂肪肝第三。
　　2地五養(yǎng)肝聯(lián)合恩替卡韋對(duì)慢性乙

5、型肝炎患者腸肝相關(guān)免疫及腸道菌群的影響
　　2.1方法：
　　2.1.1按先后順序?qū)⒎霞{入標(biāo)準(zhǔn)的慢性乙型肝炎患者以1:1隨機(jī)分配到治療組和對(duì)照組。
　　2.1.2符合納入標(biāo)準(zhǔn)的慢性乙型肝炎患者有90例，對(duì)照組45例（口服抗病毒藥恩替卡韋）；治療組45例（在對(duì)照組的基礎(chǔ)上加用“扶正祛邪”法之地五養(yǎng)肝加味方）。療程均是24周。
　　2.1.3所有患者于初診及治療后12周、24周填寫中醫(yī)證候評(píng)分表、慢性肝病量表。

6、r>　　2.1.4通過觀察和分析治療后HBV-DNA、肝功能、免疫指標(biāo)、血漿內(nèi)毒素水平、腸道菌群的結(jié)果，以及治療過程中可能發(fā)生的不良反應(yīng)事件，綜合評(píng)價(jià)中醫(yī)藥結(jié)合治療的完全性和有效性。
　　2.1.5采用SPSS20.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。所有統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)均采用雙側(cè)檢驗(yàn)，P＜0.05提示有顯著性差異；P＞0.05提示無顯著性差異。
　　2.2結(jié)果：
　　2.2.1臨床綜合療效比較，在治療24周后，治療組顯效0例，有效36

7、例，無效8例，總有效率為81.8％；對(duì)照組顯效0例，有效34例，無效10例，總有效率為77.3%。兩組綜合療效比較，P=0.661，P＞0.05，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2.2.2中醫(yī)證候評(píng)分比較，治療組治療12w、24w后，P＜0.001，提示有顯著性差異。對(duì)照組治療12w后，P=0.058，P＞0.05，提示無顯著性差異；治療24w后，P＜0.001，提示有顯著性差異。兩組間比較，P＜0.05，提示有顯著性差異。
　　2

8、.2.3中醫(yī)證候療效比較，治療24w后，治療組痊愈7例，顯效14例，有效19例，無效4例，總有效率為90.9%；對(duì)照組痊愈5例，顯效7例，有效21例，無效11例，總有效率為75.0%。兩組組間比較，P=0.021，P＜0.05，提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　2.2.4慢性肝病生存質(zhì)量比較，治療組治療前后在腹部癥狀、困乏、系統(tǒng)癥狀、活動(dòng)能力、情感、焦慮幾方面存在顯著差異(P＜0.01)，而對(duì)照組治療前后在腹部癥狀、困乏、系統(tǒng)癥狀方面有改善

9、(P＜0.05),在活動(dòng)能力、情感方面無改善(P＞0.05),在焦慮方面卻無效。
　　2.2.5血清 HBV-DNA水平比較，兩組治療12w、24w后與治療前比較，P值均＜0.001，提示有顯著性差異。兩組間治療12w相比較，P＞0.05，提示無顯著性差異；治療24w后，P＜0.05，提示有顯著性差異。
　　2.2.6血清HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率比較，治療組治療12w、24w后分別為61.3%、81.8%；對(duì)照組治療12w、24

10、w后分別為56.8%、72.7%。分別比較兩組12w、24w的血清HBV-DNA轉(zhuǎn)陰率，P＞0.05，提示無顯著性差異。
　　2.2.7血清ALT水平比較，兩組治療12w、24w后血清ALT水平均較治療前明顯下降。兩組治療12w后與治療前比較，P值均＜0.001，提示有顯著性差異；與24周比較，P＞0.05。兩組治療12w、24w后分別相比較，P＞0.05，提示無顯著性差異。
　　2.2.8血清ALT復(fù)常率比較，兩組治療12

11、w后，P=0.538，P＞0.05，提示無顯著性差異；兩組治療24w后，P=3.153，P＞0.05,提示無顯著性差異。
　　2.2.9 CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋比較，治療24w后，組內(nèi)比較，各組CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋治療后與治療前比較，P＜0.05，提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；組間比較，兩組 CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋治療后比較，P＜0.05，提示有顯著性差異。
　　2.2.10 IL-10

12、、TGF-β比較，治療24w后，組內(nèi)比較，各組IL-10、TGF-β治療后與治療前比較，P＜0.05，提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；組間比較，兩組IL-10、TGF-β治療后比較，P＜0.05，提示有顯著性差異。
　　2.2.11 IL-6、TNF-α比較,治療24w后，組內(nèi)比較，各組 IL-6、TNF-α治療后與治療前比較，P＜0.05，提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；組間比較，兩組IL-6、TNF-α治療后比較，P＜0.05，提示有顯著性差異。

13、　　2.2.12血漿內(nèi)毒素比較,治療24w后，組內(nèi)比較，各組血漿內(nèi)毒素治療后與治療前比較，P＜0.05，提示有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；組間比較，兩組血漿內(nèi)毒素治療后比較，P＜0.05，提示有顯著性差異。
　　2.2.13 24周后共收集到43個(gè)糞便標(biāo)本，其中治療組23個(gè)，對(duì)照組20個(gè)。各組隨機(jī)選取7例糞便標(biāo)本送檢。經(jīng)Illumina MiSeq高通量測(cè)序平臺(tái)檢測(cè)可知，14例標(biāo)本（治療組7例，對(duì)照組7例），共獲得811,157條有效序列，657

14、,799條優(yōu)質(zhì)序列，優(yōu)質(zhì)序列占有效序列百分比均超過了75%。通過對(duì)OTU數(shù)、ACE、Chao、Simpson、Shannon值，及Rank Abundance曲線、PCA分析比較，提示治療組較對(duì)照組在腸道菌落的多樣性上沒有明顯差異，但是在豐度上有差異，治療組菌落豐富度更高。兩組門水平比較，治療組厚壁菌門（Firmicutes)較對(duì)照組高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（66% VS35%， one-way ANOVA test，P＜0.05）；治療組擬

15、桿菌門(Bacteroidetes)較對(duì)照組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（18% VS46%，P＜0.05）。兩組屬水平比較，兩組Prevotella（普雷沃菌屬）比較差異明顯；治療組Bifidobacterium（雙歧桿菌屬）較對(duì)照組高，且有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（7% VS2%，P＜0.05）；Lactobacillus（乳酸桿菌屬）在兩組中均小于1%，差異比較不明顯（P＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、中醫(yī)藥治療慢性肝病調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)運(yùn)用補(bǔ)虛藥

16、最多，扶正祛邪可能是貫穿治療過程始終的總原則;
　　2、地五養(yǎng)肝加味方聯(lián)合恩替卡韋治療慢性乙型肝炎的臨床有效率高，能夠顯著改善中醫(yī)臨床證候，提高患者生活質(zhì)量，能夠顯著降低HBV-DNA、ALT的水平；
　　3、地五養(yǎng)肝加味方聯(lián)合恩替卡韋能改善機(jī)體和腸道的 CD4＋、CD8＋、CD4＋/CD8＋、IL-10、TGF-β、IL-6、TNF-α，調(diào)節(jié)肝腸免疫、減輕炎癥損傷；能降低血漿內(nèi)毒素水平，改善腸源性內(nèi)毒素血癥；
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