人肺腺癌放射抗拒細胞株H1299R的建立及miR-183調(diào)控HIF-1α影響H1299R放射敏感性的初步研究.pdf

1、目的：在乏氧微環(huán)境中，腫瘤細胞可通過缺氧誘導因子-1α（HIF-1α）高表達來維持其氧和代謝的穩(wěn)定，促進自身生長和轉(zhuǎn)移，從而產(chǎn)生放療抵抗導致治療失敗。有報道發(fā)現(xiàn) miR-183可調(diào)控 HIF-1α，但它們與放射敏感性之間的關系尚未闡明。本研究將在建立人肺腺癌細胞放射抗拒模型的基礎上，通過干預miRNA-183的表達，觀察細胞放射敏感性的變化，初步探討miR-183與HIF-1α在放療抵抗中的關系。
　　方法：分別通過常規(guī)分割法與亞

2、致死劑量法誘導出人肺腺癌H1299放射抗拒細胞，克隆形成實驗驗證放射抗拒性，流式細胞儀檢測細胞周期與凋亡；慢病毒轉(zhuǎn)染H1299放射抗拒細胞，RT-PCR分別檢測miR-183、HIF-1αmRNA表達，CCK-8實驗檢測細胞增殖情況。
　　結果：常規(guī)分割法（2 Gy）照射15次后的H1299R-2 Gy細胞SF2、D0等放射敏感性參數(shù)較親本細胞倍數(shù)最多，細胞存活肩區(qū)最寬，放射抗拒性最強，命名為H1299R細胞；CCK-8實驗及流式

3、實驗結果顯示，H1299R細胞與親本H1299細胞相比具有顯著的放射抗拒性（P<0.05）；RT-PCR檢測H1299R細胞中miR-183與HIF-1αmRNA水平相對 H1299細胞均呈高表達（P<0.05）；將下調(diào) miR-183的慢病毒轉(zhuǎn)染 H1299R細胞后，HIF-1αmRNA的水平也相對呈低表達（P<0.05），增殖曲線表明下調(diào)miR-183后H1299R細胞對X射線的敏感性與對照組相比無顯著差異（P>0.05）。