介孔碳納米球提高雷洛昔芬口服生物利用度的研究.pdf

1、目的：雷洛昔芬（Raloxifene，RXF）是一種兩疏性藥物，臨床上主要用于預防和治療絕經(jīng)期婦女的骨質(zhì)疏松癥。然而，首過代謝及溶出慢嚴重限制雷洛昔芬的口服吸收（口服生物利用度僅為2％）。本課題旨在設(shè)計和制備一種雷洛昔芬介孔碳納米球，用于提高其口服生物利用度。
　　方法：
　　1.以葡萄糖為碳源，采用水熱-高溫活化法制備介孔碳納米球（MCNs）。采用激光粒度儀測定碳納米球粒徑，掃描電鏡測定其形態(tài)，氮氣吸附與解吸附技術(shù)測定其比

2、表面積和孔徑分布。以比表面積和孔徑為指標對MCNs的制備條件進行優(yōu)化。
　　2.以大豆磷脂為穩(wěn)定劑，采用溶劑擴散-高壓均質(zhì)法制備載RXF的MCNs（RXF-MCNs）。采用激光粒度儀測定其粒徑和分散系數(shù)，透射電鏡儀觀測其形態(tài)，離心超濾法測定包封率；采用差示掃描量熱法（DSC）對藥物及輔料的物性進行分析；采用透析法評價藥物的體外釋放行為。
　　3.灌胃給予大鼠RXF-MCNs和RXF混懸液（對照組），靜脈注射給予RXF溶液。于

3、不同時間點采集血樣，采用 UPLC-QTOF/MS法測定血漿藥物濃度。基于非房室模型，估算RXF-MCNs與RXF混懸液的相對生物利用度。
　　4.分別將RXF-MCNs和 RXF溶液與高表達UGT1A1的MDCK細胞孵育，測定RXF-MCNs和RXF溶液在細胞內(nèi)外產(chǎn)生的代謝物量，評價MCNs對RXF腸道葡萄糖醛酸化代謝的影響。
　　5.構(gòu)建大鼠淋巴插管模型，評價MCNs在增強藥物腸道淋巴轉(zhuǎn)運方面的作用；采用HE染色-顯微成

4、像技術(shù)檢測大鼠淋巴結(jié)中MCNs的蓄積程度；采用水熱法制備熒光素鈉標記的碳納米球（FCNs），通過共聚焦激光掃描顯微鏡（CLSM）觀測FCNs的細胞內(nèi)化行為；灌胃給予大鼠FCNs，通過CLSM測定各腸段熒光強度，評價FCNs的上皮細胞膜滲透性；灌胃給予大鼠RXF-MCNs，檢測腸腔內(nèi)壁MCNs附著情況，評價其腸上皮生物粘附性。
　　結(jié)果：
　　1.優(yōu)化的MCNs粒徑在150nm左右，形態(tài)為類球形，表面疏松多孔。比表面積為213

5、8m2/g，每克MCNs可吸附RXF450mg以上（最多可達到480mg）。
　　2.RXF-MCNs為球形結(jié)構(gòu)，粒徑在230nm左右，PDI小于0.3，ζ電位為41.7mV。包封率為95.35%，物理穩(wěn)定性良好。此外，RXF-MCNs中藥物以無定形狀態(tài)存在，具有獨特的雙階段體外藥物釋放行為。
　　3.與RXF混懸液相比，RXF-MCNs的口服吸收得到改善。最大血藥濃度（Cmax）和生物利用度分別提高了1.93倍和2.07倍

6、。
　　4.MCNs能降低藥物在胃腸道的暴露率，減少藥物的腸道葡萄糖醛酸化代謝量。
　　5.RXF-MCNs的累積淋巴轉(zhuǎn)運量是對照組的8.14倍，各時間段的淋巴液藥物濃度均顯著高于對照組，最大藥物濃度達到1656.36ng/mg。MCNs蓄積于淋巴結(jié)，表明MCNs具有顯著的淋巴趨向性。細胞內(nèi)化結(jié)果顯示，F(xiàn)CNs以完整納米粒形式進入細胞。腸上皮熒光分析提示，F(xiàn)CNs具有良好的上皮細胞膜滲透性。此外，RXF-MCNs對腸腔內(nèi)壁具