尿酸對人骨髓間充質干細胞成骨分化過程中Wnt信號通路的影響.pdf

1、目的：探討不同濃度尿酸對人骨髓間充質干細胞（hBMSCs）成骨細胞分化過程中對Wnt/β-catenin信號通路相關基因表達的影響。
　　方法：采用全骨髓貼壁法體外分離培養(yǎng)健康成年人骨髓間充質干細胞，培養(yǎng)至第3代時選取生長狀態(tài)良好的hBMSC作為研究對象。實驗分為5組，為空白對照組及用含不同濃度尿酸(0，140，280，560μmol/L)的成骨誘導液進行成骨向誘導分化培養(yǎng)的實驗組，倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，于分化培養(yǎng)的第7天進行

2、細胞堿性磷酸酶成骨鑒定染色及檢測細胞成骨分化過程中堿性磷酸酶活性，第3天及第7天采用CCK-8法檢測細胞增殖能力，最后于第10天檢測利用熒光定量PCR法檢測各組細胞中Wnt信號通路中Wnt-3α，β-catenin mRNA的表達，結果進行統(tǒng)計學分析。
　　結果：倒置顯微鏡下觀察可見大量貼壁的細胞團簇，形態(tài)多呈紡錘形、梭形，第7天左右可見已全部貼壁，呈典型的集落樣生長，各實驗組組細胞堿性磷酸酶染色為陽性，且隨尿酸濃度增高，染色依次