豚鼠絕經(jīng)后腎虛型原發(fā)性骨關(guān)節(jié)炎的建立.pdf

1、目的：
　　1.探索Hartley雌性豚鼠去除卵巢能否用來建立絕經(jīng)后腎虛模型；
　　2.探索Har-tley雌性豚鼠去除卵巢能否用來建立病證結(jié)合的絕經(jīng)后腎虛型原發(fā)性骨關(guān)節(jié)(Prim-ary Osteoarhtritis,POA)模型；
　　3.探索Hartley雌性豚鼠去卵巢建立絕經(jīng)后腎虛型POA病癥結(jié)合模型的較佳月齡。
　　方法：將59只適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后的7周齡普通級Hartley雌性豚鼠，稱體重約為250g±

2、20g，打耳標(biāo)編號(hào)排序，查找隨機(jī)數(shù)字表抽取5只作為正常組直接取材，3月齡時(shí)按體重分組并多次隨機(jī)抽取共27只作為3月齡組，剩余為5月齡組，兩組分別隨機(jī)抽取5只作為對照組，其余隨機(jī)分為去勢(ovariectomy,OVX)組和假手術(shù)(sham operation.Sham)組分別為11只。去除雙側(cè)卵巢構(gòu)建絕經(jīng)后腎虛模型，去勢豚鼠構(gòu)建絕經(jīng)后腎虛型POA模型。通過觀察豚鼠一般情況、行為學(xué)表現(xiàn)、體重變化和檢測豚鼠血清環(huán)磷酸腺苷(cyclic ad

3、enosine monophosphate,cAMP)、環(huán)磷酸鳥苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)水平及其比值變化驗(yàn)證腎虛模型；通過連續(xù)觀察豚鼠陰道脫落細(xì)胞動(dòng)情周期的變化和檢測血清雌二醇(estradiol,E2)的濃度驗(yàn)證絕經(jīng)后模型；通過豚鼠膝關(guān)節(jié)大體觀和石蠟切片HE、甲苯胺藍(lán)和番紅固綠染色的組織學(xué)鏡檢及分別由OARSI(Osteoarthritis Research Society Inte

4、rnational)推薦的關(guān)節(jié)軟骨大體觀評分表、改良Mankin評分表和10分滑膜炎組織學(xué)評分表半定量評分，判斷膝關(guān)節(jié)病變并驗(yàn)證POA模型。
　　結(jié)果：
　　1.3、5月齡組中OVX組豚鼠去卵巢后都出現(xiàn)精神萎靡、毛發(fā)直立灰暗、發(fā)抖畏寒喜暖、卷縮弓背、食欲下降、大便稀溏和抓取無抵抗等腎虛表現(xiàn)，且5月齡OVX組癥狀更為突出，相對于各自的Sham組和對照組體質(zhì)量增長緩慢，Elisa結(jié)果顯示血清E2水平降低，cAMP降低，cGMP升

5、高，cAMP/cGMP顯著降低，說明腎虛模型基本建立且為腎陽虛；
　　2.陰道脫落細(xì)胞涂片顯示Sham組和對照組有正常動(dòng)情周期，而3、5月齡組中OVX組動(dòng)情周期消失且血清E2水平顯著低于前兩組，說明成功建立絕經(jīng)后模型；
　　3.大體觀除5月齡OVX組表現(xiàn)出較明顯的早中期OA變化，其余各組都基本正常，且OARSI推薦的關(guān)節(jié)軟骨大體觀半定量評分也支持這一結(jié)果；
　　4.各組改良的Mankin關(guān)節(jié)軟骨組織學(xué)半定量評分和滑膜炎

6、半定量評分對比結(jié)果一致：與正常組比較，3、5月齡對照組得分高，P＜0.05;與對照組相比，3、5月齡Sham組得分略偏高， P＞0.05，差異不顯著；與Sham組比較，3、5月齡OVX組得分明顯偏高，P＜0.05；與3月齡OVX組比較，5月齡OVX組得分偏高更為顯著，P＜0.05；
　　5.與3月齡OVX組比較，5月齡OVX組豚鼠體質(zhì)量偏低、血清E2水平降低、血清cAMP濃度更低，cGMP濃度升高，cAMP/cGMP顯著降低，結(jié)果