IVF促排卵周期取卵日前血清高孕酮濃度對著床期子宮內(nèi)膜腔上皮黏附分子表達(dá)的影響.pdf

1、在前期工作中統(tǒng)計分析了2011年1月至2013年5月間所有于本生殖中心行IVF/ICSI的全部5828例促排卵周期資料。注射hCG日和/或注射hCG次日高孕酮均使鮮胚移植未妊娠周期數(shù)增加，這提示妊娠丟失發(fā)生在胚胎著床的最初期階段，從而表現(xiàn)為未妊娠周期數(shù)的增加。我們推測，注射hCG日及注射hCG次日高孕酮可能誘導(dǎo)了LE功能的改變，高孕酮可能導(dǎo)致了LE與囊胚間的粘附力下降，從而降低了內(nèi)膜容受性。子宮內(nèi)膜不同類型細(xì)胞的特殊功能及在內(nèi)膜容受性建

2、立過程中可能有不同的角色，從hCG日和/或hCG次日孕酮升高與種植窗期子宮內(nèi)膜腔上皮黏附分子表達(dá)水平的關(guān)系這一點切入的研究未見報道。
　　目的：
　　探討取卵日前孕酮濃度、與常見粘附分子，Intergrinαvβ3，Osteopoton，Mucin16間在著床期子宮內(nèi)膜腔上皮表達(dá)量間的相關(guān)性。探討IVF促排卵周期取卵日前過早的孕酮升高，是否與著床期子宮內(nèi)膜腔上皮常見粘附分子表達(dá)的異常有相關(guān)性。
　　方法：
　　本

3、研究所使用的內(nèi)膜樣本，來自于2013年7月～2014年12月間于浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院生殖中心開展的一項為單中心，前瞻性隊列研究中所收集的內(nèi)膜樣本。
　　研究期間，醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院生殖中心的鮮胚移植策略:僅患者獲卵數(shù)≦15枚，注射hCG日孕酮≦2.0 ng/ml，且無卵巢過度刺激(ovarian hyperstimulationsyndrome，OHSS)傾向等條件均同時滿足的前提下，方可進(jìn)行新鮮胚胎移植。否則，建議患者

4、考慮全部新鮮胚胎冷凍，擇期行凍融胚胎移植。40名患者均從按照本中心已建立的新鮮胚胎移植策略選擇進(jìn)行全部胚胎冷凍的患者中選取。為模擬新鮮胚胎在體內(nèi)的環(huán)境，在獲取所有患者知情同意之后，取卵術(shù)后仍按照本中心常規(guī)黃體支持方案給予肌注黃體酮（40 mg im bid，仙居制藥廠），于注射hCG+7天使用一次性宮腔組織吸取管(Prodimed，F(xiàn)rance)自宮腔內(nèi)輕柔吸取內(nèi)膜組織。獲取內(nèi)膜組織后，立即將其置入10％中性福爾馬林中室溫固定24-48

5、小時后，按照標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行石蠟包埋。所有患者均簽署知情同意書。所有研究對象均于注射hCG日及注射hCG次日的清晨采取血樣檢測血清雌二醇濃度和孕酮濃度。
　　根據(jù)2011年-2013年間本中心的5828個IVF刺激周期注射hCG日及注射hCG次日血清孕酮濃度數(shù)據(jù)，將孕酮濃度“升高”定義為孕酮值高于整體孕酮值分布的90％百分位數(shù)，未能達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)則定義為孕酮濃度“正常”。由此，注射hCG日孕酮正?；蛏叩腸ut-off值為1.7 ng/m

6、l;注射hCG次日孕酮正常或升高的cut-off值為9.5 ng/ml。
　　本研究共包括了40位患者，其中20例為從既往獲得的取卵日前孕酮均正常的內(nèi)膜樣本中隨機(jī)挑選，另20例為從既往獲得的取卵日前孕酮升高的內(nèi)膜樣本中隨機(jī)挑選。所有40例樣本，均依據(jù)Noyes et al(1950)進(jìn)行組織形態(tài)學(xué)評分，并依據(jù)h-score評分方法進(jìn)行粘附分子integrinαvβ3，OPN，Mucin16在內(nèi)膜腔上皮表達(dá)的半定量分析。所有評分均由

7、2位經(jīng)驗豐富的觀察者按照盲法獨(dú)立完成。H-score評分方法:H-score=∑Pi(i+1)， i代表染色密度（1=弱，2=中和3=強(qiáng)），Pi代表細(xì)胞每種染色密度的百分比(0-100％).計算腔上皮的H-scores評分。每張切片由兩位觀察者分別獨(dú)立評分。若兩位觀察者所得的評分結(jié)果有差異，則由兩位觀察者再次重新讀片并討論以獲得最終結(jié)果。
　　結(jié)果：
　　1.孕酮升高組OPN在腔上皮的表達(dá)（3.44±0.58）較孕酮正常組（

8、3.42±0.6）升高，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　2.孕酮升高組αvβ3在腔上皮的的表達(dá)（2.73±1.35）較孕酮正常組（2.47±1.33）升高，但無統(tǒng)計學(xué)差異(P＞0.05)。
　　3.孕酮升高組MUC16在腔上皮的的表達(dá)（3.54±0.77）較孕酮正常組(2.51±1.19)升高，有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.001)。
　　結(jié)論：
　　IVF刺激周期中注射hCG日及注射hCG次日血清孕酮升高與著床期