宮腔分泌蛋白譜評(píng)估促排卵周期內(nèi)膜容受性的研究.pdf

1、近幾十年來(lái)體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization–embryo transfer，IVF-ET）技術(shù)迅速發(fā)展并得到廣泛應(yīng)用，臨床妊娠率能夠穩(wěn)定在40％以上，但I(xiàn)VF-ET周期胚胎種植率卻一直徘徊在20-30％左右。低種植率一直是生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域尚未解決的難題之一，也是限制輔助生殖技術(shù)（assisted reproductive technology，ART）發(fā)展的瓶頸。成功的胚胎種植取決于胚胎的侵入能力和良好的子宮

2、內(nèi)膜容受性。文獻(xiàn)報(bào)道50%-75%的妊娠丟失是由于胚胎種植失敗，而不良的子宮內(nèi)膜容受性承擔(dān)2/3以上的胚胎種植失敗。因此認(rèn)為，子宮內(nèi)膜容受性不良是導(dǎo)致胚胎著床失敗的關(guān)鍵因素。目前對(duì)子宮內(nèi)膜容受性的研究主要集中在非胚胎移植周期或動(dòng)物模型，這些數(shù)據(jù)不能將內(nèi)膜容受性與同周期的臨床結(jié)局聯(lián)系起來(lái)，使其臨床應(yīng)用價(jià)值受到限制。亦有通過(guò)宮腔沖洗液獲取宮腔分泌物研究子宮內(nèi)膜容受性的試驗(yàn)，但宮腔分泌物經(jīng)高度稀釋后，很多因子檢測(cè)率很低甚至檢測(cè)不出，使數(shù)據(jù)失去

3、了真實(shí)性。本研究通過(guò)胚胎移植前直接抽吸宮腔分泌物，檢測(cè)胚胎種植窗宮腔分泌蛋白表達(dá)譜，旨從內(nèi)膜微環(huán)境角度實(shí)時(shí)研究胚胎著床的“土壤”條件，尋找能夠預(yù)測(cè)妊娠結(jié)局的蛋白表達(dá)譜，探討圍著床期宮腔分泌蛋白譜與胚胎植入的關(guān)系。同時(shí)，本研究設(shè)計(jì)在放棄胚胎移植周期，D3（取卵后第3天）行宮腔分泌物的檢測(cè)，D7（取卵后第7天）行子宮內(nèi)膜組織活檢，檢測(cè)子宮內(nèi)膜容受性標(biāo)志物白血病抑制因子（leukemia inhibitory factor，LIF）、整合素β

4、3（integrinβ3）的表達(dá)情況，探討宮腔分泌蛋白譜與促排卵周期子宮內(nèi)膜容受性的關(guān)系。
　　研究目的：探討體外受精促排卵周期圍著床期宮腔分泌蛋白譜與妊娠結(jié)局的關(guān)系，同時(shí)研究宮腔分泌蛋白譜與促排卵周期子宮內(nèi)膜容受性的關(guān)系，建立無(wú)創(chuàng)性評(píng)估子宮內(nèi)膜容受性的技術(shù)平臺(tái)，為進(jìn)一步研究子宮內(nèi)膜容受性異常的疾病奠定理論基礎(chǔ)。材料與方法：收集首次在上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院生殖中心，因單純輸卵管因素實(shí)施體外助孕患者的資料。研究宮腔分泌物無(wú)創(chuàng)

5、、微量取樣對(duì)妊娠的影響：收集促排卵周期胚胎移植前行宮腔分泌物取樣為實(shí)驗(yàn)組，共63例；與實(shí)驗(yàn)組一般情況匹配的條件下，篩選同期促排卵后直接行胚胎移植為對(duì)照組，共171例，比較兩組患者的妊娠結(jié)局。探討宮腔分泌蛋白譜與胚胎植入的關(guān)系：將實(shí)驗(yàn)組根據(jù)妊娠結(jié)局分為妊娠組與未妊娠組，比較兩組患者17種調(diào)節(jié)因子表達(dá)譜的差異。宮腔分泌物標(biāo)本采用多重免疫分析方法，檢測(cè)宮腔分泌物中與胚胎種植有關(guān)的IL-1β、IL-13、G-CSF、IFN-r、MCP-1、MI

6、P-1β、TNF-a等17種與胚胎種植有關(guān)因子的表達(dá)。同時(shí)，為研究宮腔分泌蛋白譜與內(nèi)膜容受性的關(guān)系：我們選取同期促排卵放棄移植周期的患者，D3宮腔分泌物取樣，并在D7進(jìn)行子宮內(nèi)膜組織取樣。內(nèi)膜組織采用免疫組織化學(xué)和western-blot檢測(cè)內(nèi)膜容受性標(biāo)志物L(fēng)IF、integrinβ3蛋白的表達(dá)水平。分析比較宮腔分泌蛋白表達(dá)譜與內(nèi)膜容受性標(biāo)志物L(fēng)IF、integrinβ3表達(dá)的關(guān)系。結(jié)果：比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的一般情況、促排卵數(shù)據(jù)及妊娠結(jié)

7、局，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。實(shí)驗(yàn)組根據(jù)妊娠結(jié)局分為：妊娠組與未妊娠組。比較兩組宮腔分泌蛋白譜結(jié)果顯示：妊娠組與未妊娠組比較，IL-13（9.76±5.04 vs18.37±17.82）、IFN-r（7.50±2.62 vs8.87±2.39）、MCP-1（17.5±9.63 vs49.97±85.95）水平均低于未妊娠組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，余各因子妊娠組與非妊娠組比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。根據(jù)放棄

8、ET組宮腔分泌蛋白IFN-r，IL-13，MCP-1平均水平分為：≥平均值和＜平均值兩組，分別比較IFN-r，IL-13，MCP-1≥平均值和＜平均值兩組內(nèi)膜容受性標(biāo)志物L(fēng)IF和整合素β3表達(dá)顯示: IFN-r兩組LIF和整合素β3表達(dá)差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，(P＞0.05)。IL-13≥13.79 pg/ml組LIF水平明顯低于＜13.79 pg/ml組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，整合素β3表達(dá)兩組差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。MCP-1的