瑪咖(MACA)對腎陽虛證卵巢早衰卵巢養(yǎng)護的作用研究.pdf

1、目的:
　　針對發(fā)病率逐年增高且呈年輕化的卵巢早衰，使用國產(chǎn)瑪咖、不同劑量的秘魯進口瑪咖和中藥淫羊藿飲片對SD大鼠腎陽虛證卵巢早衰模型進行研究，實驗評價瑪咖溫補腎陽、養(yǎng)護卵巢的作用和機制，探討瑪咖性味歸經(jīng)的趨向，豐富新資源食品瑪咖在中醫(yī)養(yǎng)生本草的理論研究，填補瑪咖養(yǎng)護卵巢的實驗空白，以期加強關(guān)于瑪咖的養(yǎng)生產(chǎn)品的研發(fā)和瑪咖的產(chǎn)業(yè)化發(fā)展、助力海外本草瑪咖在中國的本土化研究，進一步探索養(yǎng)護卵巢、防治卵巢早衰的養(yǎng)生本草。
　　方法:

2、
　　1.分組:24只空白對照組（A組）為未注射氫化可的松的雌性SD大鼠。120只造模組大鼠在造模結(jié)束后隨機分為7組，其中模型對照組（B組）24只、進口秘魯瑪咖低劑量組（C組）16只、進口秘魯瑪咖中劑量組（D組）16只、進口秘魯瑪咖高劑量組16只（E組）、淫羊藿破壁飲片組（F組）16只、國產(chǎn)瑪咖粉組（G組）16只、國產(chǎn)瑪咖代用茶組（H組）16只。
　　2.造模:以144只8-9周齡SPF級成年性成熟雌性SD大鼠（未孕未產(chǎn)）為

3、研究對象，模型組120只每日上午在后下肢肌注氫化可的松32mg.kg-1.d-1，連續(xù)12d，建立腎陽虛證大鼠卵巢早衰模型。
　　3.灌胃:以上六組分別按對應(yīng)藥品（淫羊藿）或試驗用瑪咖進行灌胃，進口LMC組、進口MMC組、進口HMC組大鼠分別以2.5g·kg-1·d-1、5g·kg-1·d-1、10g·kg-1·d-1劑量進行灌胃秘魯瑪咖粉，淫羊藿組大鼠以1g·kg-1·d-1劑量灌胃淫羊藿，國產(chǎn)MC粉組大鼠以2.5g·kg-1·

4、d-1劑量給予灌胃國產(chǎn)瑪咖粉，國產(chǎn)MC茶組大鼠以2.5g·kg-1·d-1劑量給予灌胃國產(chǎn)瑪咖代用茶，模型組與空白組分別給予灌胃2.5ml·kg-1·d-1體積的純凈水。
　　4.取材:第一階段取材:造模結(jié)束后空白組和模型組中各取8只大鼠進行取材完成第一次取材，取血液、卵巢、子宮、腎臟、腎上腺。在造模結(jié)束后分別連續(xù)灌胃14天和28天后的次日，每組分別各取材8只，完成第二階段和第三階段的取材。
　　5.觀察:分別觀察各組大鼠體

5、質(zhì)量、大體外觀情況、注射部位情況，每日陰道涂片觀察動情周期、取材后計算臟器指數(shù)（卵巢、子宮、腎臟、腎上腺），檢測血清生殖激素水平:孕激素P、雌二醇E2、睪酮T、卵泡刺激素FSH、黃體生成素LH及FSH/LH比值的變化，光鏡評估卵巢組織學(xué)狀態(tài)，特別是卵泡發(fā)育（重點計數(shù)各級卵泡數(shù)），電鏡觀察評估卵巢卵泡發(fā)育狀態(tài)（重點評估原始卵泡和初級卵泡超微結(jié)構(gòu)）。
　　結(jié)果:
　　結(jié)果中恢復(fù)、改善等明顯差異的表訴均指有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05

6、)或(P＜0.01):
　　1.體質(zhì)量:B組在第一、第二、第三階段低于A組和注射前;
　　2.攝食量:B組第一階段低于A組;
　　3.大體情況（腎陽虛證外觀、動情周期、注射部位潰瘍）:在第一階段、第二階段B組比A組優(yōu);在第一階段、第二階段C、D、E、F、G、H各灌胃組比B組優(yōu)。
　　4.臟器指數(shù):①卵巢指數(shù):B組在第一階段、第二階段低于A組和注射前;C、D、F、G、H組高于B組;②子宮指數(shù):各組及各階段間無明顯差

7、異;③腎臟指數(shù):第一、二階段B組高于A組，在第二階段C、D、F組低于B組。④腎上腺指數(shù):第一、二階段明顯B組比A組低，二階段C組、D組、E組、F組比B組高。
　　5.光鏡檢測卵巢形態(tài):
　?、俚谝浑A段:A組比B組動物卵巢結(jié)構(gòu)完好，卵泡計數(shù)未見顯著差異。②第二階段:B組、C組比A組生長卵泡數(shù)量顯著減少，B組動物卵巢退行性變化，次級生長卵泡、成熟卵泡及黃體數(shù)量減少，閉鎖卵泡及囊狀卵泡數(shù)量增多。D組、E組、F組、H組比B組生長卵泡

8、顯著增多，H組黃體明顯增多。③第三階段:B組比A組卵巢退行性變化，生長卵泡減少。E組比B組生長卵泡、閉鎖卵泡數(shù)量明顯減少，F(xiàn)組比B組閉鎖卵泡明顯減少，C組黃體數(shù)量比B組顯著減少。
　　6.電鏡檢測卵泡超微結(jié)構(gòu):
　　①第一階段:卵母細胞:B組比A組出現(xiàn)較多自噬體現(xiàn)象，卵泡細胞變性或凋亡。②第二階段:卵母細胞，B組比A組可見多個自噬體和自噬溶酶體，部分細胞核固縮，核膜不整，有深切跡，偶見凋亡，可見核裂，染色質(zhì)邊聚。D組比B組明

9、顯恢復(fù);卵泡細胞:F組、C組比B組明顯改善。③三階段:卵母細胞，B組比A組可見多個自噬體，卵泡細胞部分細胞凋亡。F組、C組、D組比B組恢復(fù)。卵泡細胞:F組、C組、D組比B組明顯恢復(fù)。
　　7.生殖激素:
　?、傺宀G酮(T):在第二階段H組比B組低。②雌二醇(E2):在第一階段、第二階段B組比A組低，其余四組高于B組;③孕酮(P):在第三階段B組比A組低，在第二階段、第三階段D、F組比B組高;④促黃體生成素(LH):第一階段

10、、二階段B組比A組高，第二階段灌胃組均低于B組。⑤血清促卵泡生成素(FSH)和FSH/LH:第一階段、第二階段B組比A組高，第二階段D組、F組比B組低;
　　結(jié)論:
　　1.腎陽虛證POF造模成功，進口瑪咖和國產(chǎn)瑪咖均能較好改善SD雌性大鼠腎陽虛證、養(yǎng)護卵巢;在灌胃瑪咖二周后有效，灌胃四周后效果更明顯。D組與F組療效接近，C組、G組、H組有效，但略弱于F組和D組，E組無明顯效果。
　　2.瑪咖改善腎陽虛證養(yǎng)護卵巢機制與