蚓激酶活性及蛋白成分的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩93頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、蚓激酶(Lumbrokinase,LK)又稱蚯蚓纖溶酶,是一類來源于蚯蚓的具有纖溶活性蛋白酶的總稱。自1983年日本學者Mihara等從粉正蚓中分離到6種具有纖溶活性的蛋白質以來,許多學者對蚓激酶進行了系統的研究。文獻報道蚓激酶的主要成分是一組來源于蚯蚓的絲氨酸蛋白酶,包括纖維蛋白溶酶、纖維蛋白溶酶原激活物以及類似組織型纖維蛋白溶酶原激活物等。但蚓激酶在國外均沒有作為藥品上市。我國于1992年上市,臨床應用于缺血性腦血管病中纖維蛋白原增

2、高及血小板凝集率增高的患者。全國有5家生產企業(yè)生產蚓激酶原料及腸溶制劑,其生產原料均來源于人工養(yǎng)殖的赤子愛勝蚓(Eisenia fetida),生產工藝簡單粗放。
  蚓激酶作為我國特有的一種酶類生化藥物,在臨床上應用廣泛,療效好。但是,由于其前期研究基礎不足,產品的有效成分、活性研究、控制方法等均比較薄弱,有必要采用現代分析技術對產品中存在的問題深入研究,從而對產品的質量和安全性提升提供現代科學依據。為此,本文采用質譜、酶譜、親

3、和層析、離子交換層析、纖維平板量反應平行線法等手段,對蚓激酶的成分組成、化學結構、生物活性、質量控制方法等進行了系統研究。本文重點從三個方面對蚓激酶進行研究。
  蚓激酶組成成分研究采用胰凝乳蛋白酶酶解、LC-MS分離測定、Protein Lynx Global Server3.0軟件分析,結果顯示我國該品種的五家生產企業(yè)產品中主要存在15種蛋白質,包括4種溶纖酶與10種激酶。其中纖溶酶在每個生產企業(yè)的樣品中均有檢出,一致性較好。

4、蚓激酶國家標準物質中檢出5種與溶纖活性相關的蛋白質,包括2種纖溶酶與3種激酶。該研究表明國產蚓激酶原料藥中存在蚓激酶活性蛋白成分,存在與溶纖活性相關的蛋白質組分。
  蚓激酶活性研究重點研究了總活性定量和活性成分識別。對蚓激酶直接纖溶活性及間接纖溶活性進行研究,結果顯示蚓激酶不僅具有直接降解纖維蛋白的功能,還有激活纖維蛋白溶酶原起到間接溶解纖維蛋白的功能?;隍炯っ傅纳飳W活性及傳統效價測定方法的局限,引入了生物統計方法——量反應

5、平行線法測定蚓激酶效價。結果顯示蚓激酶原料藥及標準品均符合量反應平行線法統計學要求,該法更適用于蚓激酶的生物學活性測定。
  基于蚓激酶直接降解纖維蛋白的特點,建立測定蚓激酶活性蛋白成分的纖溶酶譜法。結果顯示纖溶酶譜法能夠清晰的顯示蚓激酶活性蛋白的存在,并且能夠作為評價蚓激酶生產工藝穩(wěn)定性的一種有效的手段。
  蚓激酶活性蛋白分離純化基于前期初步質譜鑒定結果及酶學活性,嘗試找到蚓激酶單一活性蛋白。將蚓激酶通過DEAE陰離子交

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

評論

0/150

提交評論