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1、目的:探討NLRP3炎癥復(fù)合體在呼吸機(jī)相關(guān)性肺損傷中的作用及其機(jī)制。
方法:36只清潔級(jí)雄性SD大鼠分為3組,每組12只:對(duì)照組A組、正常潮氣量組N組、大潮氣量組H組,分組采用隨機(jī)數(shù)字表法。所有大鼠均行氣管切開(kāi)插管術(shù),A組大鼠保持自主呼吸,N、H兩組分別行潮氣量為8mL/kg和40mL/kg的機(jī)械通氣。4h后行頸動(dòng)脈放血處死大鼠,收集BALF、血清和肺組織標(biāo)本。測(cè)定三組大鼠肺組織濕/干比重;分別使用光學(xué)顯微鏡和透射電鏡觀察肺組
2、織的病理學(xué)改變和肺泡巨噬細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變;使用ELISA測(cè)定BALF中總蛋白含量、BALF和血清中IL-1β、IL-18含量;分別使用RT-PCR和Western Blot檢測(cè)大鼠肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、caspase-1和NF-κB的mRNA及蛋白表達(dá)水平。
結(jié)果:鏡下觀察結(jié)果顯示,A組和N組肺組織及肺泡巨噬細(xì)胞的結(jié)構(gòu)基本正常,而H組有明顯的炎癥性改變。與A組和N組比較,H組肺組織W/D比值明顯升高(9.20±0.
3、69比5.32±0.82、5.70±0.94,均P<0.05),BALF中總蛋白、IL-1β、IL-18的含量明顯升高〔總蛋白(g/L):2.53±0.38比1.92±0.23、1.98±0.24,IL-1β(ng/L):135.96±5.40比80.88±2.77、83.14±5.09,IL-18(μg/L):4.68±0.45比2.95±0.54、3.51±0.46,均P<0.05〕,血清中IL-1β、IL-18含量也明顯升高〔IL
4、-1β(ng/L):107.10±9.06比67.33±8.08、74.36±12.02,IL-18(μg/L):2.29±0.93比1.32±0.25、1.45±0.18,均P<0.05〕。H組肺泡巨噬細(xì)胞中NLRP3、ASC、 caspase-1和NF-κB的mRNA及蛋白表達(dá)水平較對(duì)照組A組和N組均明顯升高,H組上述指標(biāo)的 mRNA表達(dá)分別是對(duì)照組A組的(13.35±2.30)、(9.04±1.92)、(8.43±2.18)、(9
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