β1腎上腺素受體、PI3K-AKT通路在甲減大鼠心力衰竭形成中的作用研究.pdf

1、目的：甲狀腺功能減退癥會導致心功能下降甚至心衰，本研究通過觀察甲減性心衰大鼠去甲腎上腺素水平的變化，對β1腎上腺素受體、PI3K/AKT通路進行研究，進一步明確β1腎上腺素受體、PI3K/AKT通路在甲減大鼠心力衰竭形成過程中的可能作用，進一步了解甲減導致心衰的相關分子機制。
　　方法：使用已經確立的腹腔注射131I致甲減性心衰的大鼠模型，分為正常對照組、100μCi組、300μCi組、500μCi組。通過測定血清總三碘甲狀腺原氨

2、酸（totaltriildothyronine，TT3）、總甲狀腺素（totalthyroxine，TT4）、促甲狀腺激素（thyrotropinorthyroidstimulatinghormone，TSH）、B型腦鈉肽（B-typenatriureticpeptide，BNP）及大鼠心臟超聲評價心臟功能，綜合判斷造模是否成功。使用ELISA測試盒測定大鼠血清中去甲腎上腺素（norepinephrineorornoradrenalin

3、e，NE）水平。RT-PCR方法測定心臟組織β1-AR、β1-ARK、PI3K、AKT基因表達水平。Western-Blot方法測定心臟β1-AR、PI3K、AKT、p-AKT蛋白表達水平。
　　結果：
　　1、大鼠甲狀腺功能：
　　實驗4周末及實驗8周末，大鼠TT3、TT4水平處理組各組與正常對照組相比降低(P＜0.05)，TSH水平處理組各組與正常對照組相比明顯升高(P＜0.05)，隨著劑量增加差異更加顯著。

4、>　　2、大鼠BNP表達水平：
　　實驗4周末，大鼠BNP水平處理組各組與正常對照組相比差異沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。實驗8周末，大鼠BNP水平處理組各組與正常對照組相比差異有統(tǒng)計學差異(P＜0.05)，并且隨著劑量增加差異更加顯著。
　　3、大鼠心臟功能
　　實驗4周末，處理組各組大鼠室間隔厚度與正常對照組相比顯著升高(P＜0.05)，700μCi以上組舒張期左室內徑與正常對照組、100μCi組、300μCi組

5、、500μCi組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，300μCi以上組左室后壁厚度、射血分數(shù)與正常對照組及100μCi組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，500μCi以上組收縮期左室內徑與100μCi組、300μCi組及正常對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，處理組各組左室內徑縮短率與正常對照組相比明顯降低(P＜0.05)。
　　實驗8周末，處理組各組大鼠室間隔厚度、左室后壁厚度與正常對照組相比顯著升高(P＜0.05

6、)，300μCi以上組舒張期左室內徑、收縮期左室內徑、射血分數(shù)、左室內徑縮短率與正常對照組、100μCi組相比差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，隨著131I劑量增加差異更加顯著，但700μCi以上組與300μCi組、500μCi組相比未見明顯差異。
　　4、大鼠8周末血清中NE水平
　　8周末大鼠血清中的NE水平，處理組(300μCi、500μCi組)與正常對照組相比明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；各處理組中，與

7、100μCi相比，300μCi組、500μCi組的上調有統(tǒng)計學差異（P＞0.05）
　　5、大鼠8周末心肌組織β1-AR、β1-ARK、PI3K、AKTmRNA表達水平
　　8周末大鼠心肌組織β1-AR處理組(100μCi組、300μCi組、500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；β1-ARK處理組(500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）

8、；PI3K處理組(300μCi組、500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；AKT處理組(300μCi組、500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　各處理組間相比較，300μCi組與100μCi組相比PI3K基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；500μCi組與100μCi組相比β1-AR、PI3K、AKT基因表達明顯上調，差異

9、有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　6、大鼠8周末心肌組織β1-AR、AKT、p-AKT、PI3K的蛋白表達
　　8周末大鼠心肌組織β1-AR處理組(300μCi組、500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；PI3K處理組(300μCi組、500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；p-AKT處理組(500μCi組)與正常對照組相比基因表達明顯

10、上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　各處理組間相比較，300μCi組與100μCi組相比PI3K基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；500μCi組與100μCi組相比β1-AR、PI3K、p-AKT基因表達明顯上調，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。
　　結論：
　　1、在甲減性心力衰竭大鼠模型中，NE水平明顯升高，從而說明甲減大鼠體內循環(huán)中的兒茶酚胺水平升高，兒茶酚胺可能參與到甲減大鼠心衰形