PI3K-AKT信號通路在THP-1細胞中對NLRP3炎癥小體的調(diào)節(jié)作用.pdf

1、導(dǎo)引：
　　磷酸肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信號通路在動脈粥樣硬化的調(diào)節(jié)中發(fā)揮關(guān)鍵作用。模式識別受體（PRR）中的Nod樣（NLR）家族成員的NLRP3激活是動脈粥樣硬化的發(fā)病機理中的關(guān)鍵步驟。NLRP3激活導(dǎo)致胱天蛋白酶-1的成熟和IL-1β和IL-18的釋放。目前PI3K/Akt信號通路對NLRP3炎癥小體的調(diào)節(jié)機制，尚不完全清楚。本課題在人單核細胞THP-1中研究PI3K/Akt信號通路對NLRP3炎癥小體的

2、潛在調(diào)節(jié)作用。
　　方法：
　　本研究以人THP-1細胞作為單核巨噬細胞，分為7組:對照組，Ox-LDL組，PI3K抑制劑組，PI3K抑制劑+Ox-LDL組，Akt抑制劑組，Akt抑制劑+LDL組，PI3K抑制劑+Akt抑制劑+Ox-LDL組。在Ox-LDL（100μg/mL）處理24小時后，加入GDC0941（1μg/mL，PI3K抑制劑）或/和MK2206（1μg/mL，Akt抑制劑）。然后采用蛋白質(zhì)印跡法測定NLRP3

3、，caspase-1，IL-1β和IL-18的蛋白表達水平。
　　結(jié)果：
　　THP-1細胞中Ox-LDL劑量和時間依賴性激活NLRP3炎癥小體。劑量-反應(yīng)和時間-反應(yīng)實驗顯示100μg/mL的Ox-LDL處理24小時時，NLRP3激活最為顯著。GDC0941和MK2206都可有效地抑制NLRP3活性，表現(xiàn)在NLRP3蛋白表達的抑制。GDC0941和MK2206也明顯地抑制NLRP3下游的caspase-1，IL-Iβ和IL