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文檔簡介
1、目的:比較胰島素生長因子-1(IGF-1)對人臍靜脈平滑肌細胞(HUVSMC)和臍動脈平滑肌細胞(HUASMC)增殖的影響,并探討其機制。
方法:本實驗采用人源臍靜脈平滑肌細胞(HUVSMC)和臍動脈平滑肌細胞(HUASMC)進行研究。①檢測濃度效應(yīng):將HUVSMC和HUASMC各分為7組,加入不同濃度的藥物。分別為:對照組、IGF-1(20ng/ml)、IGF-l(50ng/ml)、IGF-1(100ng/ml)、IGF
2、-1(150ng/ml)、IGF-1(200ng/ml)、wortmannin(200uM)。②檢測時間效應(yīng):通過濃度效應(yīng)實驗分析出IGF-1的合適濃度,加入IGF-1檢測0.5h,2h,12h,24h,48h后細胞增值及蛋白的表達。通過MTT法檢測IGF-1對兩種細胞增殖的影響,Western blotting技術(shù)檢測IGF-1對兩種細胞中磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)信號通路的影響。
結(jié)果:①不同
3、濃度的IGF-1對HUVSMC和HUASMC的增殖均有明顯的促進作用,但對HUVSMC的促增殖作用明顯高于HUASMC。②進一步檢測PI3K-Akt信號通路,IGF-1可激活PI3K-Akt信號通路,并且IGF-1對HUVSMC的激活明顯強于HUASMC。③此外,我們利用IGF-1R抗體或P13K抑制劑wortmannin處理細胞后發(fā)現(xiàn):IGF-1對細胞增殖的促進作用被明顯抑制。
結(jié)論:本研究闡明了IGF-1在平滑肌細胞增
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