鞣酸對異丙腎上腺素引起大鼠心力衰竭的保護作用及機制研究.pdf

1、目的:心力衰竭（HeartFailure,HF）作為臨床中各種常見心臟疾病的惡性歸宿之一，嚴重威脅著人們的健康。目前對于心力衰竭的研究表明，防止神經因子過度分泌、降低氧化應激水平及抗炎癥因子分泌等已成為治療心力衰竭的新靶點。鞣酸（TannicAcid,TA）作為中成藥單體，其具有對抗脂質過氧化、抗細胞凋亡、抗炎及清除機體內羥基自由基的能力。因此，我們推測，鞣酸對心力衰竭可能具有一定的治療作用。本研究的目的是探討鞣酸對異丙腎上腺素誘導的心

2、力衰竭大鼠心臟保護作用及可能的作用機制。
　　方法:選用清潔級SD雄性大鼠共計50只，將大鼠隨機分成5組，即空白對照組、異丙腎上腺素模型組、卡托普利陽性藥物對照組、鞣酸低劑量和鞣酸高劑量治療組。每組各10只大鼠，并分別稱取、記錄各組大鼠體重值。其中鞣酸低劑量組及鞣酸高劑量組的大鼠，分別給予鞣酸20mg/kg/day和40mg/kg/day進行灌胃?？ㄍ衅绽栃运幬飳φ战M的大鼠給予卡托普利灌胃操作，劑量為10mg/kg/day。空白

3、對照組和異丙腎上腺素模型組大鼠分別給予等量的生理鹽水進行灌胃給藥。同時，異丙腎上腺素模型組、卡托普利陽性藥物對照組、鞣酸低劑量組和鞣酸高劑量組大鼠的心力衰竭模型采用背部點狀皮下注射異丙腎上腺素，劑量為170mg/kg/day，持續(xù)給藥4天，空白對照組注射等體積的生理鹽水。各組大鼠分別按上述給藥治療4周。
　　于末次給藥結束后，稱量各組大鼠的體重，然后用0.3％戊巴比妥鈉麻醉。經右側的頸總動脈插管至左心室，采用BL-420E+生物信

4、號采集系統(tǒng)分別記錄平均動脈壓（MABP）、左室舒張末壓（LVEDP）、左室收縮壓（LVSP）、收縮期左心室內壓上升最大變化速率（+dp/dtmax）及舒張期左心室內壓下降最大變化速率（-dp/dtmax）。隨后取血，分離血清，以便用于試劑盒檢測血清中腦鈉肽（BNP）、內皮素-1（ET-1）及一氧化氮（NO）水平。取大鼠心臟組織，經4%多聚甲醛固定后，用于做蘇木素和伊紅（H&E）染色及免疫組化檢測，以便組織病理形態(tài)學的檢測。剩余的心臟組織

5、放入液氮中冷凍，采用相應試劑盒測定心臟組織中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活性及丙二醛（MDA）的含量，并通過WesternBlotting測定組織中凋亡蛋白（Bax及Bcl-2）、核轉錄因子P65（NF-?BP65）水平，通過免疫組化測定c-fos及c-jun水平。
　　結果：
　　1、鞣酸對SD大鼠體重的影響
　　與空白對照組大鼠相比，異丙腎上腺素模型組的大鼠體重明顯降低（P<0.0

6、5）。而鞣酸低劑量組、鞣酸高劑量組和卡托普利陽性對照組大鼠的體重結果提示，心衰大鼠給予鞣酸和卡托普利治療后，體重則明顯高于異丙腎上腺素心衰模型組（P<0.05）。
　　2、鞣酸對大鼠心肌組織病理形態(tài)學的影響
　　其中，空白對照組的大鼠心臟組織沒有出現(xiàn)明顯的組織病理形態(tài)學改變。而相比之下，異丙腎上素模型大鼠的心臟組織則出現(xiàn)了明顯的組織病理改變。光鏡下可見，異丙腎上腺素模型組心肌細胞出現(xiàn)大片纖維化區(qū)域和散在心肌細胞壞死灶，且合并

7、有心肌纖維增粗、變形、排列紊亂，心肌細胞出現(xiàn)斷裂、橫紋肌消失或溶解等病理學形態(tài)改變。與模型組相比，鞣酸組及卡托普利組纖維化區(qū)域及壞死范圍顯著減小，剩余心肌細胞形態(tài)及排列較為整齊。其中，鞣酸高劑量組大鼠心肌纖維形態(tài)及排列基本正常，無明顯腫脹、斷裂及溶解現(xiàn)象出現(xiàn)。
　　3、鞣酸對大鼠血清中BNP水平的影響
　　異丙腎上腺素模型組大鼠血清中BNP水平明顯高于空白對照組（P<0.05）。但鞣酸低劑量組、鞣酸高劑量組及卡托普利組大鼠血

8、清中BNP水平明顯降低（P<0.05）。
　　4、鞣酸對大鼠血流動力學的影響
　　異丙腎上腺素模型組大鼠的平均動脈壓（MABP）、左室收縮壓（LVSP）、收縮期左心室內壓上升最大變化速率（+dp/dtmax）及舒張期左心室內壓下降最大變化速率（-dp/dtmax）較空白對照組明顯降低（P<0.05），但左室舒張末壓（LVEDP）水平明顯高于空白對照組（P<0.05）。但給予鞣酸及卡托普利治療后，大鼠血流動力學各指標水平明顯趨

9、于正常（P<0.05）。
　　5、鞣酸對大鼠血清中ET-1和NO的影響
　　與空白對照組相比，異丙腎上腺素模型組大鼠的血清ET-1水平呈現(xiàn)明顯升高的現(xiàn)象（P<0.05），而NO水平則明顯下降（P<0.05）。但是，與模型組大鼠相比，在所有鞣酸低劑量組和鞣酸高劑量治療組的大鼠的血清ET-1呈現(xiàn)出明顯下降趨勢，而NO水平則表現(xiàn)出明顯的升高趨勢，并且指標變化具有顯著性差異（P<0.05）。
　　6、鞣酸對大鼠心臟組織中SOD

10、、GSH-Px、MDA的影響
　　與空白對照組相比，異丙腎上腺素模型組的心臟組織中SOD和GSH–Px的活性明顯降低（P<0.05）。但是與異丙腎上腺素模型大鼠心臟組織相比，鞣酸和卡托普利治療組的大鼠心臟中，這兩種酶的活性的下降趨勢明顯減小（P<0.05）。此外，異丙腎上腺素模型組大鼠的心臟組織中的MDA的濃度比空白對照組明顯增高（P<0.05）。給予鞣酸及卡托普利治療后，MDA濃度明顯低于異丙腎上腺素模型組大鼠（P<0.05）。

11、
　　7、鞣酸對大鼠心肌細胞凋亡水平的影響
　　空白對照組心肌細胞的凋亡程度維持在一個較低水平。相比之下，異丙腎上腺素模型組的心肌細胞凋亡水平明顯升高，Bax/Bcl-2、NF-?B（P65）及c-fos、c-jun水平顯著升高（P<0.05）。給予鞣酸及卡托普利治療后，上述指標水平顯著降低（P<0.05）。
　　結論：本研究結果表明鞣酸能夠起到對異丙腎上腺素引起的心衰大鼠心肌損傷的保護作用。鞣酸的這些對心衰心肌損傷的