對(duì)化濕行瘀清熱方劑治療口腔扁平苔蘚前后血清中差異蛋白的研究.pdf

1、目的：對(duì)口腔扁平苔蘚(oral lichen planus,OLP)患者使用化濕行瘀清熱方劑前、后血清中的差異蛋白進(jìn)行研究，探討化濕行瘀清熱方劑對(duì)口腔扁平苔蘚的治療效果及相關(guān)作用機(jī)制。
　　方法：
　　1.抽取OLP患者初診和經(jīng)化濕行瘀清熱方劑治療8周后的靜脈血，靜置30min后離心，吸取上層血清，苯酚抽提法提取總蛋白，Bradford法測(cè)定蛋白濃度，采用雙向熒光差異凝膠電泳技術(shù)(two-dimensional fluore

2、scence difference gel electrophoresis,2-D DIGE)篩選治療前、后的差異蛋白。
　　2.液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)(liquid chromatography-mass spectrometry， LC-MS)鑒定由2-D DIGE篩選出的OLP患者治療前、后血清中的差異蛋白點(diǎn)。
　　3.蛋白免疫印跡法(Western blot)驗(yàn)證 OLP患者治療前后血清中差異蛋白的表達(dá)情況。

3、　　4.酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)對(duì) OLP患者治療前后血清中差異蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行定量研究。
　　結(jié)果：1.口腔扁平苔蘚患者經(jīng)過化濕行瘀清熱方劑治療前、后的血清中存在差異蛋白點(diǎn)，質(zhì)譜技術(shù)對(duì)差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證，篩選出的差異蛋白有結(jié)合珠蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、補(bǔ)體成分C1、維生素D結(jié)合蛋白；2.Western blot結(jié)果顯示結(jié)合珠蛋白的表達(dá)量在口腔扁平苔蘚患者治療后的血清中較治療前高,人抗凝血酶Ⅲ在治療后的血清中表達(dá)量較治療前低(

4、P＜0.05)；3.ELISA結(jié)果顯示結(jié)合珠蛋白在口腔扁平苔蘚患者治療后的血清中濃度較治療前升高(P＜0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.化濕行瘀清熱方劑治療口腔扁平苔蘚患者前、后的血清中存在的差異蛋白包括結(jié)合珠蛋白、人抗凝血酶Ⅲ、補(bǔ)體成分C1和維生素D結(jié)合蛋白。
　　2.結(jié)合珠蛋白在口腔扁平苔蘚患者治療后血清中的表達(dá)升高，人抗凝血酶Ⅲ的表達(dá)降低，這兩種蛋白表達(dá)量的差異與化濕行瘀清熱方劑對(duì)口腔扁平苔蘚的作用機(jī)制有一定關(guān)系