丹紅化瘀口服液聯(lián)合二甲雙胍對(duì)ZDF大鼠DR的作用及機(jī)制研究.pdf

1、目的:
　　本研究以遺傳性Ⅱ型糖尿病Zucker diabetic fatty(ZDF)大鼠為實(shí)驗(yàn)對(duì)象，考察丹紅化瘀口服液(DHK)單用以及聯(lián)合二甲雙胍使用對(duì)糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabeticretinopathy，DR)的防治作用，并初步探討其可能的作用機(jī)制。
　　方法:
　　ZDF大鼠給予Purina＃5008飼料飼養(yǎng)至13周齡時(shí)，根據(jù)空腹血糖水平(fastingblood glucose，F(xiàn)BG)將糖尿病ZDF大

2、鼠隨機(jī)分成四組:模型對(duì)照組（蒸餾水，3.2mL/kg/d）、二甲雙胍組(209 mg/kg/d)、DHK組(3.2 mL/kg/d)和DHK聯(lián)合二甲雙胍組（DHK3.2 mL/kg/d+二甲雙胍209 mg/kg/d），每組6只。另以Zucker lean大鼠作為瘦型對(duì)照動(dòng)物(蒸餾水，3.2 mL/kg/d)。每天灌胃一次，連續(xù)19周。
　　試驗(yàn)期間每天密切觀察動(dòng)物狀態(tài);每周測一次體重;隔周測量動(dòng)物FBG、24 h攝食量、24 h

3、飲水量;22周齡測量24 h尿量。給藥19周后，應(yīng)用視覺電生理檢查儀檢查閃光視網(wǎng)膜電圖(FERG)和視網(wǎng)膜震蕩電位(OPs)評(píng)價(jià)視網(wǎng)膜功能，蘇木素-伊紅(HE)染色觀察大鼠視網(wǎng)膜組織形態(tài)，綜合評(píng)價(jià)DHK單用以及聯(lián)合二甲雙胍使用對(duì)ZDF大鼠DR的防治作用。
　　檢測血液相關(guān)指標(biāo)，如糖化血紅蛋白(HbA1c)水平、胰島素水平、血脂四項(xiàng)、血小板計(jì)數(shù)和形態(tài)學(xué)指標(biāo)、血小板聚集率、Von Willebrand因子(vWF)、丙二醛(MDA)和

4、細(xì)胞間黏附分子-1(ICAM-1)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力以及血液流變學(xué)指標(biāo)。HE染色觀察胰島組織形態(tài)。計(jì)算HOMA-IR（胰島素抵抗水平）和HOMA-β（胰島β細(xì)胞功能）值。
　　結(jié)果:
　　(1)與瘦型對(duì)照組比，胖型糖尿病ZDF大鼠FERG a波和b波振幅顯著下降，潛伏期均顯著延長;OPs的OP1、OP2、OP3和OP4潛伏期顯著延長。以上視網(wǎng)膜功能的改變提示ZDF大鼠出現(xiàn)了DR。DHK和二甲雙胍單獨(dú)使用時(shí)FE

5、RG a、b波以及OPs各波的振幅和潛伏期無明顯改變。但是，聯(lián)合用藥組FERG a波和b波潛伏期顯著縮短，OPs各子波潛伏期明顯縮短。
　　(2)瘦型對(duì)照組動(dòng)物視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)完整，各層結(jié)構(gòu)清晰，內(nèi)界膜表面平整，無新生血管。糖尿病ZDF大鼠視網(wǎng)膜內(nèi)界膜明顯腫脹、表面不平整、厚度增加，伴隨著新生血管的出現(xiàn)。二甲雙胍組視網(wǎng)膜組織形態(tài)與模型對(duì)照組相似。DHK組和聯(lián)合用藥組視網(wǎng)膜各層清晰可見，內(nèi)界膜腫脹減輕，新生血管減少。
　　(3)與瘦

6、型對(duì)照組比，糖尿病ZDF大鼠體重?zé)o顯著差異，24 h攝食量、飲水量和尿量顯著增加。藥物對(duì)上述指標(biāo)的改變無作用。
　　(4)與瘦型對(duì)照組比，糖尿病ZDF大鼠FBG、HbA1c和胰島素水平升高，出現(xiàn)明顯的胰島素抵抗現(xiàn)象，胰島β細(xì)胞功能受損。二甲雙胍單用、DHK單用以及聯(lián)合用藥均能顯著降低FBG和HbA1c水平，改善胰島素抵抗。而且，DHK聯(lián)合二甲雙胍用藥降低血糖作用比單用二甲雙胍和DHK更顯著。
　　(5)與瘦型對(duì)照組比，糖尿病

7、ZDF大鼠低密度脂蛋白(LDL-c)、總膽固醇(TC)和甘油三酯(TG)水平升高。二甲雙胍單用對(duì)上述指標(biāo)的增加無降低作用，DHK單用以及聯(lián)合用藥均顯著降低LDL-c和TG水平。
　　(6)與瘦型對(duì)照組比，糖尿病ZDF大鼠vWF、ICAM-1和MDA水平明顯上升，SOD活力明顯下降。DHK顯著降低vWF、ICAM-1和MDA水平。DHK聯(lián)合二甲雙胍使用明顯降低MDA水平。
　　(7)與瘦型對(duì)照組比，糖尿病ZDF大鼠的平均血小板

8、體積(MPV)、血小板壓積(PCT)和平均血小板分布寬度(PDW)增大，血小板聚集率顯著升高。DHK顯著減小MPV和PCT，降低ADP誘導(dǎo)的血小板聚集率。二甲雙胍單用以及聯(lián)合用藥顯著減少ADP誘導(dǎo)的血小板聚集。
　　(8)與瘦型對(duì)照組比，糖尿病ZDF大鼠全血和血漿粘度明顯增加。二甲雙胍單用對(duì)血液粘度的增加無改善作用，DHK能顯著減小全血粘度。
　　結(jié)論:
　　DHK單獨(dú)用藥和二甲雙胍單獨(dú)用藥對(duì)DR無作用，而DHK聯(lián)合二