玄丹散結(jié)湯對子宮腺肌病模型小鼠痛覺過敏的療效評價及作用機(jī)理初探.pdf

1、目的:在成功建立子宮腺肌病小鼠模型的基礎(chǔ)上，通過一系列實驗方法和療效指標(biāo)，評價玄丹散結(jié)湯對腺肌病模型小鼠痛覺過敏的療效，并探討其作用機(jī)理。
　　方法:將新生ICR小鼠隨機(jī)分為5組，設(shè)為空白組、模型組、西藥組、低劑量中藥組和高劑量中藥組，空白組為對照組，模型組、西藥組、低劑量中藥組和高劑量中藥組為實驗組。實驗組小鼠運用口服他莫昔芬法建立子宮腺肌病小鼠模型，3月后從模型組、西藥組、低劑量中藥組、高劑量中藥組中隨機(jī)選取6只，分別給予一定

2、濃度的蒸餾水、達(dá)那唑、低劑量的玄丹散結(jié)湯和高劑量的玄丹散結(jié)湯灌胃。從對照組中隨機(jī)選取6只，予蒸餾水灌胃。每組小鼠每天灌胃1次，灌5天停2天，連續(xù)2月。期間通過疼痛行為學(xué)實驗（甩尾實驗、熱板實驗、機(jī)刺實驗、丙酮實驗及扭體實驗）觀察各組小鼠疼痛敏感度變化并評價玄丹散結(jié)湯的鎮(zhèn)痛效果。2月后處死小鼠，肉眼觀察子宮充血情況及體積大小，電子秤稱量子宮、卵巢重量，游標(biāo)卡尺測量子宮直徑。顯微鏡下觀察小鼠子宮病灶結(jié)節(jié)數(shù)。收集小鼠子宮組織和背根神經(jīng)節(jié)，將子

3、宮組織制成石蠟切片，行HE染色觀察子宮組織形態(tài)學(xué)變化，記錄病理評分，免疫組化、RT-PCR檢測子宮組織、背根神經(jīng)節(jié)中神經(jīng)生長因子β(NGF-β)、p75神經(jīng)營養(yǎng)因子受體(p75NTR)、酪氨酸激酶受體A(TrkA)蛋白及mRNA表達(dá)的情況，行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果:1.疼痛行為學(xué)實驗結(jié)果:實驗組小鼠比對照組小鼠疼痛閾值更低，對疼痛更敏感。實驗組之間對比，高、低劑量中藥組和西藥組小鼠的疼痛閾值比模型組高，表明玄丹散結(jié)湯和達(dá)那唑能夠緩

4、解腺肌病模型小鼠的疼痛癥狀，降低小鼠對疼痛的敏感度。其中高劑量中藥組對小鼠疼痛閾值的提升最明顯，表明高劑量的玄丹散結(jié)湯治療效果最好。
　　2.藥物療效結(jié)果:中藥組和西藥組均能縮小子宮體積，減輕子宮重量，改善表面充血現(xiàn)象，減少病灶節(jié)結(jié)數(shù)和降低病理評分，表明玄丹散結(jié)湯和達(dá)那唑?qū)ο偌〔∧Ｐ托∈缶行?，并且高劑量的玄丹散結(jié)湯療效最佳。
　　3.免疫組化及RT-PCR結(jié)果:子宮組織中，實驗組與對照組比較，NGF-β、p75NTR、Tr

5、kA蛋白及mRNA的表達(dá)水平均有顯著上調(diào)。實驗組間比較，模型組表達(dá)水平最高，高劑量中藥組表達(dá)水平最低。背根神經(jīng)節(jié)中，實驗組與對照組比較，p75NTR mRNA表達(dá)水平無顯著差異，TrkA mRNA表達(dá)水平顯著上調(diào)。實驗組間比較，p75NTR mRNA表達(dá)水平在各組間無明顯差異，TrkA mRNA在模型組中表達(dá)最高，在高劑量中藥組中表達(dá)最低。
　　結(jié)論:1口服他莫昔芬法能夠成功建立子宮腺肌病動物模型，可用于臨床疾病研究
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