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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:探討輔助性 T細(xì)胞因子(白介素-4、白介素-13、γ-干擾素)對(duì)于人氣道壁血管平滑肌細(xì)胞去整合素金屬蛋白酶33(ADAM33)基因表達(dá)的影響。
方法:將人肺組織標(biāo)本進(jìn)行原代細(xì)胞培養(yǎng),獲得人氣道壁血管平滑肌細(xì)胞,分別與不同濃度白介素-4、白介素-13、γ-干擾素(IL-4、IL-13、IFN-γ)共培養(yǎng),采用實(shí)時(shí)定量反轉(zhuǎn)錄多聚酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法及蛋白印跡法(Western Blot)測(cè)定不同刺激時(shí)間及不同刺激濃度
2、ADAM33基因表達(dá)的變化,驗(yàn)證人氣道壁血管平滑肌細(xì)胞中 ADAM33基因表達(dá)與 IL-4、IL-13、IFN-γ刺激的濃度關(guān)系和時(shí)間關(guān)系。
結(jié)果:人氣道壁血管平滑肌細(xì)胞中存在ADAM33的表達(dá),當(dāng)IL-4、IL-13刺激濃度增加時(shí),ADAM33基因表達(dá)增加,總體呈現(xiàn)出濃度依賴性趨勢(shì),當(dāng) IFN-γ刺激濃度增加時(shí),ADAM33基因表達(dá)減少;當(dāng)分別以100ng/mL IL-4、IL-13刺激時(shí),隨刺激時(shí)間延長(zhǎng),ADAM33基因的
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