大鼠血管平滑肌細(xì)胞蛋白組學(xué)的研究以及尼古丁對血管平滑肌細(xì)胞蛋白和基因表達(dá)影響的研究.pdf

1、 本文在實驗中應(yīng)用蛋白組學(xué)的研究方法觀察了尼古丁刺激組(處理組)血管平滑肌細(xì)胞和非刺激組(對照組)血管平滑肌細(xì)胞的蛋白表達(dá)圖譜，并選擇2倍以上差異表達(dá)的蛋白質(zhì)(表達(dá)上調(diào)或下調(diào))利用肽指紋質(zhì)譜和串聯(lián)質(zhì)譜法對其進(jìn)行鑒定。并在隨后的實驗中采用熒光定量RT-PCR方法對這些蛋白的編碼基因進(jìn)行了體外擴增，了解其基因的表達(dá)變化。目的是采用先進(jìn)的科研手段，從分子生物學(xué)水平對尼古丁的致病機理進(jìn)行探討。 剖析了大鼠血管平滑肌細(xì)胞雙向電泳技術(shù)

2、平臺的建立目的強調(diào)了蛋白組學(xué)中最重要的核心技術(shù)即是蛋白質(zhì)雙向電泳，雙向電泳的分辨率涉及樣品處理、等電聚焦、SDS-PAGE凝膠電泳、染色等技術(shù)，為了獲得良好的大鼠血管平滑肌細(xì)胞的蛋白表達(dá)譜，我們對雙向電泳實驗條件進(jìn)行優(yōu)化處理。 本文運用該項技術(shù)，我們可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量或定性分析。定量分析包括絕對定量和相對定量分析。并應(yīng)用熒光相對定量的簡要計算方法2-△△CT對尼古丁引起的基因表達(dá)變化作出了相對定量分析。發(fā)現(xiàn)，尼古丁可