丹參多酚酸對應(yīng)激大鼠抑郁樣行為的改善作用及相對端粒長度變化的研究.pdf

1、目的：觀察丹酚酸對慢性溫和應(yīng)激所致的大鼠抑郁樣行為的影響及應(yīng)激后外周血和右側(cè)海馬相對端粒長度變化。
　　方法：將92只健康雄性，體質(zhì)量在110-150g的清潔級Sprague Dawley大鼠按照隨機(jī)數(shù)字法分為5組，即非應(yīng)激+生理鹽水組（對照組）1個，19只；應(yīng)激+生理鹽水組干預(yù)，19只；其他研究組分別為應(yīng)激+氟西汀干預(yù)（氟西汀組），18只；應(yīng)激+丹參多酚酸干預(yù)（丹酚酸組），20只；應(yīng)激+氟西汀+丹酚酸干預(yù)（聯(lián)合組），16只。除對

2、照組外，其余4組進(jìn)行慢性溫和應(yīng)激造模。每日采用2種應(yīng)激方法，同種應(yīng)激不能連續(xù)出現(xiàn)，平均每種刺激被采用3次，使動物不能預(yù)料應(yīng)激的發(fā)生，對照組不接受任何實(shí)驗(yàn)應(yīng)激源，連續(xù)應(yīng)激21天，建立抑郁模型。造模成功后，應(yīng)激各組每日不定時繼續(xù)給予以上應(yīng)激，且每天下午各組分別腹腔注射相對應(yīng)的丹參多酚酸40 mg/kg，氟西汀20 mg/kg，生理鹽水，丹酚酸40 mg/kg+氟西汀20 mg/kg，體積體質(zhì)量比10 ml/kg，每周固定時間進(jìn)行蔗糖偏愛實(shí)驗(yàn)

3、，記錄大鼠蔗糖和水消耗量，統(tǒng)計(jì)蔗糖偏好率（G,％），糖水偏好率=蔗糖水消耗量/（蔗糖水消耗量+純水消耗量）×100%。稱體質(zhì)量，統(tǒng)計(jì)其體質(zhì)量增長率（K,%），即應(yīng)激3周后體質(zhì)量增長率=（應(yīng)激后體質(zhì)量-應(yīng)激前1周體質(zhì)量）/應(yīng)激后體質(zhì)量×100%；給藥3周后體質(zhì)量增長率=（給藥后體質(zhì)量-應(yīng)激3周后體質(zhì)量）/給藥后體質(zhì)量×100%。給藥3周后進(jìn)行強(qiáng)迫游泳測試，Morris水迷宮測試（Morris Water Maze, MWM）。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采

4、用SPSS19.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，大鼠體質(zhì)量（g）、蔗糖偏好率（G,%）、強(qiáng)迫游泳后4分鐘靜止不動時間（T4，單位:s）、水迷宮前5天的平均逃避潛伏期（s）及第6天的穿越平臺象限（s）、大鼠的全血相對端粒長度數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x?s）表示，大鼠右側(cè)海馬相對端粒長度采用中位數(shù)（四分位數(shù)間距），Median（Interquartile range），即M（IQR）表示，檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05。對5組的大鼠的基線水平的體質(zhì)量（g）、應(yīng)激3周后與

5、給藥3周后體質(zhì)量增長率（K,%）、蔗糖偏好率、強(qiáng)迫游泳后4分鐘靜止不動時間（ T4,單位: s）、大鼠的全血相對端粒長度進(jìn)行單因素方差分析和Bonferroni法兩兩比較，水迷宮前5天大鼠的平均逃避潛伏期進(jìn)行重復(fù)測量分析。水迷宮第6天大鼠穿越平臺象限時間（單位: s）采用進(jìn)行單因素方差分析和Bonferroni法兩兩比較。對應(yīng)激3周后和給藥3周后水迷宮第6天各組大鼠穿越平臺象限時間進(jìn)行配對t檢驗(yàn)。大鼠右側(cè)海馬相對端粒長度采用Kruska

6、l Walli檢驗(yàn)，Nemenyi檢驗(yàn)用于右側(cè)海馬相對端粒長度組間兩兩比較。
　　結(jié)果：
　　1、基線水平時：5組的體質(zhì)量和蔗糖偏好率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.412, P=0.237;F=2.175, P=0.078）。
　　2、慢性溫和應(yīng)激建立抑郁大鼠模型，應(yīng)激3周后，5組大鼠的體質(zhì)量增長率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=10.775, P＜0.001），對照組、氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組與生理鹽水組相比較，K有差異，且差

7、異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＜0.001）；應(yīng)激3周后，5組的蔗糖偏好率分別為：生理鹽水組：（43.95±12.38）%，氟西汀組：（48.56±12.25）%，丹酚酸組：（48.00±10.33）%，聯(lián)合組：（45.31±10.17）%，對照組：（67.37±13.02）%。5組比較蔗糖偏好率的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=12.453，P＜0.001），對照組的蔗糖偏好率高于其他組（均P＜0.001）；應(yīng)激3周后各組大鼠T4分別為，生理鹽水組：（3

8、2.55±10.54）s，氟西汀組：（31.93±13.99）s，丹酚酸組：（34.72±10.66）s，聯(lián)合組：（35.02±12.75）s，對照組：（18.68±5.28） s，5組比較 T4有差異，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=4.777，P=0.002），應(yīng)激各組T4高于對照組（均P＜0.05）；應(yīng)激3周后大鼠水迷宮測試前5天數(shù)據(jù)重復(fù)測量分析顯示各處理組間平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=5.732, P＜0.001），測量時間之間

9、差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=136.000, P＜0.001），處理組和測量時間對大鼠的水迷宮結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=1.964, P=0.061）。多變量方差分析顯示：應(yīng)激第1天，各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=0.272, P＞0.05），應(yīng)激第2-5天，各組大鼠平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F分別為15.148,6.632,2.009,2.743,均P＜0.05）。其中應(yīng)激第2天，經(jīng)Bonferroni兩兩比較得到，應(yīng)激4組平均逃避

10、潛伏期均值高于對照組（均P＜0.05）。應(yīng)激4組之間分別比較，其平均逃避潛伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。應(yīng)激3周后5組大鼠的水迷宮第6天穿越平臺象限時間進(jìn)行單因素方差分析顯示，各組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=19.233, P＜0.001）。經(jīng)Bonferroni兩兩比較得到，應(yīng)激4組大鼠的穿越平臺象限時間低于對照組（均P＜0.001）。應(yīng)激4組大鼠兩兩比較穿越平臺象限時間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。
　　3、給藥3

11、周后：5組大鼠的體質(zhì)量增長率（K）有差異，其中生理鹽水組：（11.17±4.65）%，氟西汀組：（22.34±6.70）%，丹酚酸組:（19.11±4.76）%，聯(lián)合組：（21.58±7.25）%，對照組：（19.67±6.67）%，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=10.084, P＜0.001），氟西汀組與丹酚酸、聯(lián)合組分別比較，體質(zhì)量增長率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），氟西汀組K高于生理鹽水組，K差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；丹

12、酚酸與聯(lián)合組、對照組分別比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），丹酚酸組體質(zhì)量增長率高于生理鹽水組，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；聯(lián)合組與丹酚酸組比較，體質(zhì)量增長率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），聯(lián)合組與生理鹽水組比較，體質(zhì)量增長率差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.001）；給藥3周后，蔗糖偏好測試：5組的蔗糖偏好率（G）有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（F=18.809, P＜0.001）。氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組與對照組的G差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均

13、＞0.05）。生理鹽水組的大鼠G低于其他4組（均P＜0.001）。給藥3周后強(qiáng)迫游泳測試：給藥3周后，5組大鼠的T4差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=6.137, P＜0.001），氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組的 T4分別與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），生理鹽水組的T4高于對照組（P＜0.001）。氟西汀組與丹酚酸組、聯(lián)合組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）；給藥3周后Morris水迷宮測試（MWM）顯示，前5天5組大鼠平均逃避潛

14、伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=16.243, P＜0.001），測量時間之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=9.359, P＜0.001）。多變量方差分析顯示：給藥第1-5天，各組大鼠平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F分別為6.762,7.248,3.923,8.145,4.678；均P＜0.01），其中給藥第1天，經(jīng)過Bonferroni兩兩比較得到，對照組與丹酚酸組、氟西汀組、聯(lián)合組之間平均逃避潛伏期差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05），而對照組與

15、生理鹽水組平均逃避潛伏期差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。生理鹽水組平均逃避潛伏期時間高于其他4組（均P＜0.001）。5組的水迷宮測試第6天大鼠穿越平臺象限時間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=14.499, P＜0.001）。經(jīng)過Bonferroni兩兩比較得到，對照組與氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組大鼠的穿越平臺象限時間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P＞0.05）。生理鹽水組穿越平臺象限時間低于其他各組（均P＜0.05），聯(lián)合組穿越平臺象限時間高于丹酚酸組

16、，且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　給藥3周后，各組間全血相對端粒長度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=18.910, P＜0.001）。經(jīng)Bonferroni兩兩比較，氟西汀組、丹酚酸組、聯(lián)合組、對照組的全血相對端粒長度均值高于于生理鹽水組（均 P＜0.001）。采用Kruskal Wallis檢驗(yàn)對大鼠右側(cè)海馬相對端粒長度進(jìn)行分析（χ2=12.004, P＜0.05）。用Nemenyi檢驗(yàn)進(jìn)行兩兩比較，對照組、氟西汀組、丹酚酸組的