脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞對皮膚移植成活過程的影響.pdf

1、目的：
　　本文旨在從促進(jìn)血管化、抑制炎癥及促進(jìn)膠原形成等方面分析探討脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞(adipose-derived stem cells，ASCs)對皮膚移植成活過程的影響。
　　方法：
　　取30只SD大鼠，隨機(jī)分為實驗組ASC組及對照組PBS組,每組各15只大鼠。于背部中央各取3cm×3cm全層皮膚及其肉膜組織，ASCs經(jīng)過分離、提取及鑒定后分別注射于ASC組大鼠背部筋膜層，對照組對應(yīng)注射PBS后，將游離皮片回

2、植，打包加壓固定。分別與第1、2、3、7及14天通過激光多普勒儀進(jìn)行評估皮膚成活情況及血流灌注情況，并取材行相關(guān)組織學(xué)及分子生物學(xué)檢查。血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)免疫組織化學(xué)檢測皮片血管生成情況;同時對14天的組織行血管性血友病因子(von Willebrand Factor, vWF)免疫熒光檢測，進(jìn)一步了解CM-Dil標(biāo)記的ASCs的轉(zhuǎn)歸。馬松及天狼猩紅染色觀

3、察膠原形成情況,免疫組織化學(xué)染色抑制瘢痕形成因子轉(zhuǎn)化生長因子β3(transforming growth factorβ3，TGF-β3)的表達(dá)。通過實時定量PCR檢測炎癥相關(guān)的細(xì)胞因子的表達(dá)，并通過免疫熒光以及westeen blot檢測巨噬細(xì)胞亞型的分布。
　　結(jié)果：
　　ASC組皮膚移植后血流灌注明顯高于對照組，14天后，ASCs組新血管形成，膠原沉積，膠原蛋白Ⅰ型與Ⅲ型比和VEGF水平和TGFβ3表達(dá)高于PBS組。此