半腱肌腱及其組織工程化衍生物重建前交叉韌帶的效果及轉(zhuǎn)歸.pdf

1、背景：
　　當今，自體腘繩肌腱（半腱肌腱+股薄肌腱）已成為前交叉韌帶（ACL）重建的標準移植物，而對于人體腘繩肌腱移植后的組織學轉(zhuǎn)歸仍然知之甚少。同時，隨著同種異體肌腱組織在ACL重建手術中的應用日益增多，越來越迫切地需要探索提高異體肌腱移植物重建效果的方案，以達到與自體肌腱移植物類似的效果。因此深入了解自體肌腱組織重建ACL后的組織學轉(zhuǎn)歸方式、影響因素及相關機制，有助于探索促進異體肌腱移植物良好轉(zhuǎn)歸的技術手段。本研究擬通過脫細胞

2、方法制備特定酸堿度微環(huán)境的同種異體脫細胞肌腱，并且聯(lián)合自體肌腱干細胞（TDSCs），以取得理想的ACL重建效果。同時，通過對人體半腱肌腱重建ACL后的移植物樣本進行組織學分析，觀察其轉(zhuǎn)歸情況。
　　目的：
　　1.制備pH值改良的同種異體脫細胞肌腱并檢測其基本特性；
　　2.觀察pH值改良的同種異體脫細胞肌腱重建ACL的效果；
　　3.觀察pH值改良的同種異體脫細胞肌腱聯(lián)合自體TDSCs重建ACL的效果；

3、　　4.探討人自體半腱肌腱重建ACL后的中、長期組織學轉(zhuǎn)歸。
　　方法：
　　1.應用以胰蛋白酶/TritonX-100/過氧乙酸為基礎、輔以碳酸氫鈉中和處理，制備pH值改良的兔同種異體脫細胞半腱肌肌腱，并通過光鏡/電鏡組織學檢測、力學測試、細胞相容性測試檢測其基本特性；
　　2.應用該pH值改良的同種異體脫細胞半腱肌腱重建兔ACL，與同種異體半腱肌腱移植物進行對照研究，通過組織學、力學、micro-CT等技術手段分析

4、其重建效果；
　　3．聯(lián)合應用自體TDSCs與pH值改良的同種異體脫細胞半腱肌腱重建兔 ACL，與同種異體半腱肌腱移植物進行對照研究，通過組織學、力學、micro-CT等技術手段分析其重建效果，并通過Lv-eGFP轉(zhuǎn)染標記技術進行細胞示蹤研究；
　　4．通過光鏡/透射電鏡檢測手段，分析人自體半腱肌腱重建ACL后的組織學轉(zhuǎn)歸，進行中/遠期移植物的對照研究。
　　結(jié)果：
　　1.應用胰蛋白酶/TritonX-100/

5、過氧乙酸+碳酸氫鈉脫細胞方案，制備得到了力學性能保留完好、細胞相容性良好、疏松多孔、pH值調(diào)定在7.2左右的同種異體脫細胞肌腱材料；
　　2.該脫細胞肌腱重建ACL后在以下方面優(yōu)與普通異體肌腱：術后第2、4周關節(jié)腔部分及骨隧道部分細胞、血管長入；2-12周膠原重塑及腱骨愈合；術后12周失效載荷及剛度；術后12周隧道壁骨密度。
　　3.該脫細胞肌腱聯(lián)合自體TDSCs重建ACL后在以下方面優(yōu)與普通異體肌腱：術后第2、4周關節(jié)腔部

6、分及骨隧道部分細胞、血管長入；2-12周膠原重塑及腱骨愈合；術后12周失效載荷及剛度；術后4、8、12周隧道壁骨密度及8、12周BV/TV；術后4-12周均追蹤到eGFP陽性細胞。
　　4.人半腱肌腱移植物的中/長期組中均觀察到細胞化水平、血管化水平不成熟、存在組織化生狀態(tài)的情況；兩組均具有相當高比例的呈雙峰分布類型的膠原構型及較低比例的呈單峰分布的膠原構型。相關指標統(tǒng)計分析未見差異。
　　結(jié)論：
　　1.pH值改良的