齊拉西酮對(duì)LPS引起的小膠質(zhì)細(xì)胞活化作用的研究.pdf

1、背景：精神分裂癥是一種致殘性極高的慢性重性精神疾病，人群終生患病率近1％，其病理機(jī)理至今仍未明確。研究顯示，神經(jīng)元的毒性損害與精神分裂癥大腦結(jié)構(gòu)變化和病程進(jìn)展有關(guān)，而氧化應(yīng)激啟動(dòng)的小膠質(zhì)細(xì)胞活化，產(chǎn)生大量致炎性自由基、細(xì)胞因子等可以對(duì)神經(jīng)元造成直接的毒性損害。誘導(dǎo)性NO合酶（iNOS）和NADPH氧化酶（NOX2）是小膠質(zhì)細(xì)胞氧化應(yīng)激的關(guān)鍵酶，iNOS和NOX2的激活可以產(chǎn)生一系列細(xì)胞因子從而對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生損傷，抑制這兩個(gè)關(guān)鍵酶的表達(dá)和激

2、活可以抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化從而對(duì)神經(jīng)元細(xì)胞產(chǎn)生保護(hù)作用。
　　目的：通過(guò)利用脂多糖（Lipopolysaccharide,LPS）建立小膠質(zhì)細(xì)胞在體和離體炎癥模型，聚焦于小膠質(zhì)細(xì)胞活化的關(guān)鍵酶iNOS和NOX2及其活化后的氧化應(yīng)激產(chǎn)物，來(lái)探討在體和離體中非典型抗精神病藥物對(duì)活化小膠質(zhì)細(xì)胞活化的作用并探索其作用的機(jī)制。
　　方法：1、通過(guò)腹腔注射LPS建立在體動(dòng)物腦內(nèi)系統(tǒng)炎癥模型；2、運(yùn)用ELISA法檢測(cè)齊拉西酮對(duì)離體小膠質(zhì)活

3、化后NO表達(dá)的作用。3、通過(guò)免疫印跡法（Western blot）檢測(cè)不同濃度齊拉西酮對(duì)在體和離體小膠質(zhì)細(xì)胞誘導(dǎo)性一氧化氮合酶（iNOS）蛋白表達(dá)的作用；4、通過(guò)western blot的方法檢測(cè)齊拉西酮對(duì)在體小膠質(zhì)細(xì)胞NOX2亞單位gp91phox表達(dá)的影響。5、通過(guò)Oxyblot方法檢測(cè)藥物對(duì)在體和離體小膠質(zhì)細(xì)胞蛋白氧化（蛋白羰基化水平）的作用；6、通過(guò)實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-PCR）檢測(cè)齊拉西酮對(duì)在體和離體小膠質(zhì)細(xì)胞iNOS m

4、RNA的作用。
　　結(jié)果：在體部分：1、LPS引起紋狀體部位 iNOS表達(dá)的升高；2、LPS引起的紋狀體部位iNOS的升高可以被齊拉西酮抑制而不能被舒必利抑制。3、LPS對(duì)紋狀體部位NOX2亞單位gp91phox的表達(dá)無(wú)明顯作用。4、齊拉西酮能抑制LPS引起的蛋白羰基化產(chǎn)物的升高。5、齊拉西酮能抑制LPS引起的iNOS mRNA的升高。離體部分：1、齊拉西酮可以抑制LPS引起小膠質(zhì)細(xì)胞活化所釋放的NO量；2、齊拉西酮可以抑制LPS

5、引起的BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞內(nèi)iNOS以及iNOS mRNA的表達(dá)增高。3、齊拉西酮能抑制BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞活化后細(xì)胞蛋白羰基化產(chǎn)物的升高。4、、LPS和齊拉西酮對(duì)BV-2小膠質(zhì)細(xì)胞NOX2亞單位gp91phox的表達(dá)無(wú)明顯作用。
　　結(jié)論：非典型抗精神病藥物可以通作用于小膠質(zhì)細(xì)胞的兩個(gè)關(guān)鍵酶 iNOS以及NOX2來(lái)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞的活化，從而對(duì)神經(jīng)元產(chǎn)生保護(hù)作用,但其作用機(jī)制尚需進(jìn)一步探索。
　　意義：我們對(duì)于非典型抗精神病藥物