青稞中β-1，3-葡聚糖酶分離純化及性質(zhì)研究.pdf

1、β-1,3-葡聚糖酶[E.C.3.2.1.39]存在于大多數(shù)高等植物中,并由一個小基因家族編碼,在植物不同的生理活動中起著重要作用.如細(xì)胞分裂、小孢子發(fā)生、花粉的形成、受精作用和胚的發(fā)生,并參與了植物對損傷,低溫、臭氧和UVB等做出的生理反應(yīng),而且是植物種子發(fā)芽和防御反應(yīng)中的關(guān)鍵物質(zhì).青稞是中國青海、西藏特有的高原作物,研究發(fā)現(xiàn)青稞種子中含有較高的β-1,3-葡聚糖酶,但是未有從青稞中提純β-1,3-葡聚糖酶的文獻(xiàn)報道.該文運用硫酸銨沉

2、淀、DEAE-A25和CM-Cellose離子交換柱層析、Sepharyl-S-300-HR的FPLC,從青稞發(fā)芽種子的胚中提純得到一種β-1,3-葡聚糖酶,分析了此酶的等電點、最佳反應(yīng)溫度和最佳反應(yīng)pH,運用非變性凝膠電泳膠板直接活性染色方法對酶進(jìn)行了快速鑒定,測定了近紫外和遠(yuǎn)紫外圓二色光譜,并計算出酶二級結(jié)構(gòu)和三級結(jié)構(gòu),并結(jié)合酶活測定和內(nèi)源熒光光譜分析,考察了金屬離子對酶的影響,并對酶熱穩(wěn)定性和熒光發(fā)射光譜變化進(jìn)行研究.熱穩(wěn)定性實驗