涎腺腺樣囊性癌口腔相關(guān)微生物組的初步研究.pdf

1、涎腺腺樣囊性癌（salivary adenoid cystic carcinoma，SACC）是一種發(fā)生于涎腺腺體的較常見的上皮性惡性腫瘤，在口腔頜面部惡性腫瘤中達11％。SACC一般生長緩慢，具有嗜神經(jīng)侵襲和肺轉(zhuǎn)移特性，尤其術(shù)后5年和10年的累積肺轉(zhuǎn)移率可分別高達70％和100％，且臨床難以確定其明確的浸潤范圍，手術(shù)、放療及化療效果均不理想，高復(fù)發(fā)率、預(yù)后差，故深入了解相關(guān)危險因素，早發(fā)現(xiàn)、早診斷以及早治療是SACC診治的重點。

2、>　　口腔環(huán)境是細菌的一個天然性的儲存庫,通過基于16S rDNA的高通量測序技術(shù)在口腔中檢出微生物種類達10000多種，并預(yù)言微生物種類可能達25000多種，由此可見口腔微生物種群的復(fù)雜性。研究認為口腔細菌因素與腫瘤的發(fā)展存在一定程度的關(guān)聯(lián)性，因為除了人類自身攜帶的基因在機體本身內(nèi)發(fā)揮作用、影響機體生命代謝外，還存在大量與宿主共生的微生物基因。已發(fā)現(xiàn)與胰腺癌、胃癌、口腔鱗狀細胞癌以及動脈粥樣硬化相關(guān)的微生物種群的多樣性變化，尚未見關(guān)于

3、SACC與微生物關(guān)系的研究報道，故本實驗利用Miseq高通量測序技術(shù)，檢測SACC患者唾液及菌斑中微生物種群變化，為SACC的相關(guān)標(biāo)志物研究和早期診斷提供依據(jù)。
　　目的：分析比較SACC患者和健康對照人群唾液和牙菌斑微生物組結(jié)構(gòu)的多樣性，比較其微生物組結(jié)構(gòu)組成和差異，探尋與SACC相關(guān)的微生物種群，為SACC的早期診斷和預(yù)防提供新的理念和思路。
　　方法：采集13名涎腺腺樣囊性癌患者和10名健康對照人群（兩組年齡構(gòu)成基線一

4、致）的唾液和牙菌斑為研究對象，使用基于16S rDNA的高通量測序技術(shù)，通過細菌16S rDNA V3+V4區(qū)PCR擴增的Miseq測序技術(shù)，分析SACC患者與健康人群微生物組結(jié)構(gòu)。
　　結(jié)果：（1）23個唾液樣本和18個菌斑樣本中共檢測出797342條序列，其中優(yōu)質(zhì)序列為706748條，平均長度為443.13 bp；（2）唾液和牙菌斑樣本中共檢測出16個門，26個綱，45個目，71個科，135個屬；SACC患者唾液和菌斑中微生物

5、多樣性均較健康對照組低；（3）唾液組：總共有18個菌屬在SACC組與健康對照組存在統(tǒng)計學(xué)上的差異（p<0.05），其中7個菌屬在SACC組中檢出高于健康對照組，分別為：鏈球菌屬、普氏菌屬、纖毛菌屬、韋榮氏球菌屬、二氧化碳噬纖維菌屬、顆粒鏈菌屬、口動菌屬，11個菌屬低于對照組：奈瑟氏菌屬、梭桿菌屬、放線菌屬、卟啉單胞菌屬、Candidate_division_TM7_norank、孿生球菌屬、羅氏菌屬、莫拉克斯氏菌屬、彎曲桿菌屬、擬普雷奧

6、菌屬、毛絨厭氧桿菌屬；（4）菌斑組：總共有21個菌屬在實驗組與對照組中存在統(tǒng)計學(xué)上的差異（p<0.05），有5個菌屬在SACC組檢出量高于健康對照組：鏈球菌屬、韋榮氏球菌屬、顆粒鏈菌屬、嗜血桿菌屬、Candidate_division_TM7_norank，16個菌屬檢出量低于對照組：奈瑟氏菌屬、普氏菌屬、纖毛菌屬、梭桿菌屬、放線菌屬、噬二氧化碳噬纖維菌屬、卟啉單胞菌屬、彎曲菌屬、擬普雷奧菌屬、棒狀桿菌屬、毛絨厭氧桿菌屬、莫拉克斯氏菌屬

7、、坦納菌屬、聚生菌屬、孿生球菌屬、羅氏菌屬；（5）PCoA分析顯示：在口腔唾液和牙菌斑兩個不同的環(huán)境中，兩者之間的微生物組成集中在兩個不同的區(qū)域，可能存在較大的差異；（6）SACC組的菌斑韋榮球菌屬、唾液鏈球菌屬較正常組有極高的檢出。
　　結(jié)論：（1）本研究初步認識SACC患者口腔微生物種群的結(jié)構(gòu)和多樣性變化；(2)較對照組檢出差異的多種菌屬與SACC發(fā)生發(fā)展可能存在相關(guān)性，對SACC的診斷標(biāo)志物研究具有一定意義和價值，并有待進一