ERK及其抑制劑和涎腺腺樣囊性癌關系的研究.pdf

1、腺樣囊性癌(adenoidcysticcarcinoma，ACC)是涎腺最常見的惡性腫瘤之一，占全部涎腺惡性腫瘤的27％，占頭頸部惡性腫瘤的1％。腺樣囊性癌侵襲性強，容易侵犯血管和神經(jīng)，易于復發(fā)和早期出現(xiàn)遠處轉移，遠期生存率低。如何有效地預防和治療腺樣囊性癌的復發(fā)和轉移是研究的熱點和難點，深入研究腺樣囊性癌侵襲轉移的分子調控機制，尋找有效靶點，進而阻斷其關鍵環(huán)節(jié)，可能成為預防和治療腺樣囊性癌的復發(fā)和轉移的新方法。 腫瘤的發(fā)生涉及

2、多種細胞事件及生理過程，其中細胞信號傳導通路的異常起著重要作用。Ras/Raf/MEK/ERK通路(ERKs信號傳導通路)是一個典型的將細胞外信號向細胞核內傳遞并刺激核內轉錄增加的級聯(lián)反應，研究顯示ERK1/2(extracellularsignal-regulatedkinase，ERK)在肝癌、乳腺癌、頭頸部鱗癌、前列腺癌及腎癌等多種惡性腫瘤組織與細胞系中異常表達或活性增強，提示ERK通路調控異常與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關；因此目

3、前有關ERK抑制劑的研究較多，其中PD98059可特異性阻斷ERK上游分子MEK對ERK1/2的磷酸化活化，是體外研究ERK通路在細胞中作用的理想阻斷劑。 本研究從體外和體內實驗來探討ERK抑制劑PD98059對涎腺腺樣囊性癌肺高轉移細胞(ACC-M)增殖和裸鼠實驗性肺轉移的作用。1.用免疫細胞化學SP法來檢測ACC-M細胞中磷酸化ERK1/2的表達，結果發(fā)現(xiàn)ERK1/2在ACC-M細胞的胞漿中陽性表達；將不同濃度(0、12.5

4、、25、50、100μmol/L)的PD98059作用于ACC-M細胞，結果ACC-M細胞增殖受到不同程度的抑制，其中100μmol/L與對照組間存在顯著差異(P＜0.05)。2.通過裸鼠尾靜脈內注射ACC-M細胞建立腺樣囊性癌實驗性肺轉移模型，6周后經(jīng)腹腔注射0.1mg/kgPD98059，每周2次，連續(xù)注射4周后全部處死，完整取出肺組織，肉眼和組織學觀察裸鼠實驗性肺轉移情況。結果實驗組和對照組肺標本表面可見大小、數(shù)量不等的轉移結節(jié)，

5、結節(jié)數(shù)量在1-13個之間；結節(jié)大者直徑達5-6mm，小者粟粒大?。唤Y節(jié)呈圓形或橢圓形，灰白色，略透明。結合肺轉移結節(jié)大小和數(shù)目將肺轉移灶按輕重程度分為Ⅰ級、Ⅱ級和Ⅲ級，結果實驗組中Ⅲ級肺轉移灶的例數(shù)少于對照組。肺轉移結節(jié)鏡下表現(xiàn)為：肺組織內可見多個大小不一的腫瘤轉移灶，腫瘤細胞異形性明顯，核漿比例較大，胞核濃染，異常核分裂相明顯。3.通過在裸鼠背部注射ACC-M細胞建立腺樣囊性癌移植瘤模型，測量移植瘤體積變化，接種5周后處死裸鼠，分離出