肺癆康對耐異煙肼肺結(jié)核小鼠TLR2、TLR4、IL2及miRNA-155表達(dá)的影響及作用機(jī)制初探.pdf

1、目的：考察中藥肺癆康對耐異煙肼肺結(jié)核小鼠受體蛋白、細(xì)胞因子及 miRNA表達(dá)的影響，初步探討肺癆康治療耐異煙肼肺結(jié)核的免疫-炎癥機(jī)制。
　　方法：本研究采用小鼠尾靜脈注射法建立耐異煙肼肺結(jié)核動物模型，隨機(jī)分為耐異煙肼組（模型組）、異煙肼組、肺癆康組及異煙肼聯(lián)合肺癆康組，分別給予生理鹽水、異煙肼、肺癆康、異煙肼聯(lián)合肺癆康灌胃治療56天；另設(shè)空白對照組，給予生理鹽水灌胃。①比較小鼠一般體征及體重變化，造模4周后取小鼠肺臟組織進(jìn)行細(xì)菌培

2、養(yǎng)；治療結(jié)束后肉眼及光鏡下觀察小鼠肺、肝、脾三臟組織病理變化。②免疫組化方法，檢測各組小鼠肺組織中TLR2、TLR4、IL2的含量。③實時定量PCR檢測法，測定各組小鼠肺組織中miRNA-155的表達(dá)水平。
　　結(jié)果：①與空白組比較，模型組小鼠體重變化有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），肺臟細(xì)菌培養(yǎng)可見明顯菌落生長；與模型組比較，肺癆康及異煙肼聯(lián)合肺癆康治療可改善感染結(jié)核小鼠的皮毛、精神狀況及進(jìn)食等一般狀態(tài)，使小鼠的體重正常增長（P<0

3、.05），使小鼠肺、肝、脾臟炎癥顯著減輕（P<0.05）。②與空白組比較，模型組TLR2、TLR4含量明顯升高（P<0.05），IL2明顯降低（P<0.05）；與模型組比較，肺癆康及異煙肼聯(lián)合肺癆康治療對 TLR2、TLR4的高表達(dá)有顯著下調(diào)作用（P<0.05），且能顯著升高IL2的含量（P<0.05）。③與空白組比較，模型組miRNA-155的表達(dá)顯著上調(diào)（P<0.05）；與模型組比較，肺癆康及異煙肼聯(lián)合肺癆康治療可明顯抑制高表達(dá)的m

4、iRNA-155（P<0.05）。
　　結(jié)論：①從造模后動物的一般體征、客觀指標(biāo)及模型的穩(wěn)定性等方面進(jìn)行判斷分析，采用小鼠尾靜脈注射法建立肺結(jié)核小鼠模型是成功的。②肺癆康治療耐異煙肼肺結(jié)核模型小鼠，能顯著改善小鼠的一般體征及組織病變，減輕肺、肝、脾臟炎癥反應(yīng)，抑制TLR2、TLR4蛋白及miRNA-155基因的高表達(dá)，同時顯著升高細(xì)胞因子 IL-2的表達(dá)。③耐異煙肼結(jié)核分枝桿菌感染動物后可引起 TLR2、TLR4及miRNA-15