巴柳氮鈉對(duì)實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎的防治作用及腸上皮細(xì)胞TLR2、TLR4的影響.pdf

1、目的：本研究通過回腸-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)建立大鼠實(shí)驗(yàn)性末端回腸炎動(dòng)物模型觀察巴柳氮鈉的防治作用及對(duì)腸上皮細(xì)胞TLR2、TLR4的影響。
　　方法：清潔級(jí)、雄性健康SD大鼠100只，隨機(jī)分為A-E五組：正常對(duì)照組（A）、造模對(duì)照組（B）、巴柳氮鈉50mg.kg-1.d-1組（C）、75mg.kg-1.d-1組（D）及100 mg.kg-1.d-1組（E），每組20只。B-E組分別行回腸末端-盲腸側(cè)側(cè)吻合術(shù)、A組只作腹腔注射麻醉。造模后2

2、周時(shí)，C-E組大鼠分別給予巴柳氮鈉50mg.kg-1.d-1、75mg.kg-1.d-1、100mg.kg-1.d-1懸液各1ml灌胃處理，A、B組予以生理鹽水1ml灌胃作為對(duì)照，期間觀察術(shù)后動(dòng)物的一般狀態(tài)。術(shù)后第4、8周分批處死動(dòng)物，取距吻合口1-3cm處末端回腸組織，行蘇木素－伊紅（hematoxylin-eosin staining, HE）染色，觀察五組大鼠末端回腸組織的病理變化，進(jìn)行肉眼、鏡下炎癥評(píng)分（histopatholo

3、gical score,HS）及上皮間淋巴細(xì)胞（intraepithelial lymphocyte，IEL）計(jì)數(shù)。使用免疫組化（immunohistochemistry, IHC）染色（Elivison二步法）檢測(cè)各組末端回腸炎粘膜中TLR2、TLR4的表達(dá)情況。
　　結(jié)果：⑴實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的一般情況術(shù)后3-5天，所有造模SD大鼠均出現(xiàn)一般狀況差，其中體重下降較明顯，此時(shí)造模組和巴柳氮鈉各組與正常對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.

4、05）。2-4周各組體重逐步恢復(fù),4周后各時(shí)期五組的體重下降無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義( P>0.05)。⑵末端回腸組織肉眼組織病理學(xué)評(píng)分4周時(shí)，所有造模SD大鼠末端回腸組織肉眼觀均為以急性炎癥為主的表現(xiàn)，但造模組炎癥較巴柳氮鈉各組重，評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加，三組炎癥程度逐漸減輕，評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。8周時(shí)，造模組炎癥明顯，而巴柳氮鈉各組炎癥程度依次減輕，四組評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑶末端

5、回腸組織光鏡下組織病理學(xué)評(píng)分4周時(shí)，各手術(shù)組末端回腸組織鏡下觀均為急性炎癥為主的表現(xiàn)，B組的HS高于A、C、D、E組（P<0.05)；隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加，三組炎癥程度依次減輕，評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。8周時(shí)，B、C-E組進(jìn)入慢性炎癥表現(xiàn)，B組與A、C-E組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；而此時(shí)期 C-E組炎癥明顯減輕，三組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。⑷末端回腸組織上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)4周時(shí)，B組上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)

6、數(shù)高于A、C-E組（P<0.05）；C-E組上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)高于A組（P<0.05），隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增加，C-E三組間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)依次降低（P<0.05）。8周時(shí)，B組鏡下以上皮間淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)粘膜及粘膜下層為主，與A、C-E組相比，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。C-E組鏡下上皮間淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)依次減少，三組評(píng)分有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）,其中E組與A組相比，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。⑸末端回腸組織TLR2、TLR4的表達(dá)4

7、周時(shí)，B組末端回腸組織TLR2、TLR4平均吸光度（A）值高于A、C-E組(P<0.05),C-E組TLR2、TLR4平均吸光度（A）值高于A組(P<0.05)，隨著巴柳氮鈉灌胃劑量的增大，C-E組TLR2、TLR4平均吸光度（A）值依次降低（P<0.05）。8周時(shí)，造模組 TLR2、TLR4的平均吸光度（A）值高于A、C-E組（P<0.05）；C-D組TLR2、TLR4的平均吸光度值高于A組(P<0.05)，而E組TLR2、TLR4的