玉郎傘葉、根水提物對鴨慢性乙型肝炎治療作用的研究.pdf

1、目的:
　　建立鴨乙型肝炎慢性感染模型，研究玉郎傘根水提物和玉郎傘葉水提物對鴨慢性乙型肝炎的治療作用。
　　方法:
　　采用1日齡廣西麻鴨雛鴨，頸靜脈接種0.2ml DHBV-DNA強陽性病毒血清。于接種后52天分別從頸靜脈采血0.5ml。采用聚合酶鏈式反應(yīng)(PCR)法檢測篩選出陽性感染鴨，隨機分為5組，每組8只。模型組（等容量雙蒸水）;玉郎傘葉水提物高劑量組(20 g.kg-1);玉郎傘葉水提物低劑量組(10 g.k

2、g-1);玉郎傘根水提物高劑量組(20g.kg-1);玉郎傘根水提物低劑量組(10 g.kg-1)。其余未感染的作為正常對照組（等容量雙蒸水）。各組動物在同樣條件下飼養(yǎng)，于接種后60天開始，每天空腹i.g給藥，連續(xù)給藥150天。分別于用藥前(T0)、用藥30天(T30)、60天(T60)、90天(T90)、120天(T120)、150天(T150)、及停藥后7天(P7)分別取血;最后一次取血后將所有動物用戊巴比妥鈉麻醉，解剖取肝組織，作

3、適當(dāng)處理，用于相關(guān)指標的檢測。
　　(1)應(yīng)用FQ-PCR法檢測鴨血清DHBV-DNA含量;ELISA法檢測鴨血清DHBsAg、 DHBeAg含量;用全自動生化分析儀檢測ALT和AST活性。
　　(2)用相應(yīng)試劑盒檢測肝勻漿液上清中SOD、GSH-PX的活性以及MDA、GSH的含量;采用HE染色觀察肝細胞病理變化。
　　(3)提取肝組織DNA，F(xiàn)Q-PCR法檢測各組DHBV-cccDNA的含量。
　　(4)ELI

4、SA法檢測血清Col-Ⅰ、LN、HA的含量。試劑盒法檢測肝組織中Hyp的含量。
　　(5)提取肝組織總RNA，RT-PCR法測定Col-Ⅰ和TIMP-2的mRNA表達情況。
　　結(jié)果:
　　(1)與模型組比較，AYLSL和AYLSR各個劑量組給藥后均能降低鴨血清DHBsAg，DHBeAg和DHBV-DNA含量(P＜0.05，P＜0.01)，降低ALT和AST活性(P＜0.05，P＜0.01)。停藥7d后，均沒有明顯反跳

5、現(xiàn)象（P＞0.05）。
　　(2)與模型組比較，AYLSL和AYLSR各個劑量組均能增加肝組織勻漿中SOD和GSH-Px活性以及GSH含量，降低MDA的含量(P＜0.05，P＜0.01)。能減輕肝細胞病理損傷(P＜0.05，P＜0.01)。
　　(3)與模型組比較，AYLSLH和AYLSRH各個劑量組中肝組織DHBV-cccDNA含量均減少(P＜0.05，P＜0.01)。
　　(4)與模型組比較，AYLSL和AYLSR

6、各個劑量組給藥后均能降低鴨血清Col-Ⅰ、LN、HA的含量，降低肝組織Hyp的含量(P＜0.05，P＜0.01)。
　　(5)與模型組比較，AYLSL和AYLSR各個劑量組均能下調(diào)肝組織Col-ⅠmRNA表達;下調(diào)TIMP-2的mRNA表達情況(P＜0.05，P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　AYLSL和AYLSR對DHBV引起的慢性乙型肝炎有一定的治療作用，能抑制肝臟病情的惡化。其機制可能是與抗病毒、抑制脂質(zhì)過氧化，