sCD163和sCD25在兒童噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增生癥診治中的意義.pdf

1、研究背景：
　　噬血細(xì)胞性淋巴組織細(xì)胞增多癥(hemophagocytic lymphohistocytosis, HLH)，又稱噬血細(xì)胞綜合征(hemophagocytic syndrome, HPS)，是一種嚴(yán)重危及生命且極易漏診的超炎癥反應(yīng)綜合征，在兒童時(shí)期較為多見，臨床表現(xiàn)復(fù)雜多樣，病情進(jìn)展極其迅猛，死亡率極高。早期診斷對(duì)于減少患者死亡率至關(guān)重要，因?yàn)槟壳叭狈I(yè)界公認(rèn)的特異性較高的診斷標(biāo)準(zhǔn)以及沒有驗(yàn)證性金標(biāo)準(zhǔn)，盡早明確診斷

2、對(duì)于臨床醫(yī)師來說仍然是一個(gè)嚴(yán)峻的挑戰(zhàn)。
　　單核/巨噬細(xì)胞血紅蛋白清道夫受體(CD163)是表達(dá)在活化的單核和巨噬細(xì)胞細(xì)胞膜上的一種跨膜糖蛋白，研究顯示，CD163可以直接激活單核和巨噬細(xì)胞胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，調(diào)節(jié) TNF-a，IL-10、IL-6等炎癥因子的表達(dá)，在炎癥反應(yīng)中起到抗炎及抗氧化作用。在炎癥刺激下，由巨噬細(xì)胞膜上的CD163分子脫落下來形成可溶性sCD163，當(dāng)機(jī)體由于感染、腫瘤、自身免疫性疾病等各種原因?qū)е戮奘杉?xì)胞過

3、度活化時(shí)，血清sCD163分子表達(dá)會(huì)明顯增高，成為巨噬細(xì)胞活化的標(biāo)志之一。可溶性CD25(sIL-2Ra)主要來源于Treg細(xì)胞、活化的T/B淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞膜表面的CD25分子脫落，是一種重要的免疫抑制因子，可與活化的細(xì)胞表面IL-2R競爭性結(jié)合IL-2，降低IL-2的活性，其水平高低與體內(nèi)炎癥反應(yīng)的嚴(yán)重程度成正相關(guān)。sCD25是T淋巴細(xì)胞激活的指標(biāo)之一，也是HLH診斷指標(biāo)之一。
　　血清 sCD163和 sCD25的生物學(xué)功

4、能目前仍知之甚少，國內(nèi)外的研究多集中于其在疾病中的表達(dá)情況，它們已成為多種疾病具有重要評(píng)估價(jià)值的血清學(xué)標(biāo)志物。近些年國內(nèi)外對(duì)血清sCDl63和sCD25的研究越來越多，雖然血清sCD25已經(jīng)作為HLH的診斷標(biāo)準(zhǔn)之一，但是臨床普及程度仍不夠，而目前我國對(duì)HLH的臨床和病理研究資料尚需進(jìn)一步完善。
　　酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)是三大經(jīng)典標(biāo)記免疫技術(shù)之一，隨著相關(guān)

5、新技術(shù)的不斷問世，明顯地提高該分析和測定方法的特異性、靈敏度及其自動(dòng)化程度，使酶免疫技術(shù)不斷更新，應(yīng)用范圍不斷拓寬。當(dāng)前，酶免疫技術(shù)已在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)中廣泛應(yīng)用，成為了臨床常用且操作簡單的檢驗(yàn)方法之一。
　　研究目的：
　　本研究通過檢測 HLH組、非 HLH感染組及正常對(duì)照組兒童外周血血清sCD163和sCD25水平，探討血清sCD163和sCD25水平在HLH診斷中的作用，與HLH的臨床表現(xiàn)的相關(guān)性，以及在 HLH治療前后

6、的變化趨勢，并分析血清sCD163和sCD25對(duì)HLH的診斷效能及對(duì)治療效果的評(píng)估作用。
　　研究方法
　　收集從2013年12月至2014年12月在鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院兒科門診及住院部就診的HLH患兒42例，非HLH感染患兒32例，同期在我院體檢的健康兒童24例作為正常對(duì)照組，且三組間年齡、性別及生活地區(qū)無顯著差異(P＞0.05)。所有患兒HIV抗體陰性，均無家族遺傳性疾病，且臨床資料完整，研究對(duì)象家長均知情同意。HLH患

7、兒分別于治療前、治療后2周、治療后8周三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各抽取清晨空腹外周靜脈血3ml。非HLH感染組患兒及正常對(duì)照組兒童于首次就診時(shí)抽取外周靜脈血3ml，所有標(biāo)本均置于普通干燥管中，室溫下放置2小時(shí)后于1000×g離心15 min，留取上清液分裝于無熱源、無內(nèi)毒素的EP管中，放置于-80℃冰箱保存?zhèn)溆谩?br>　?、俨捎肊LISA方法檢測HLH組、非HLH感染組和健康對(duì)照組的外周血血清sCD163和sCD25水平，比較治療前三組中血清sCD1

8、63和sCD25水平的差異；比較發(fā)病因素不同的HLH患兒之間血清sCD163和sCD25水平的差異；比較HLH組患兒治療前后血清sCD163和sCD25水平的變化趨勢；采用ROC曲線評(píng)價(jià)血清sCD163和sCD25水平對(duì)HLH的診斷效能。
　　②收集HLH組患兒的臨床及實(shí)驗(yàn)室檢查資料，分析血清sCD163和sCD25水平與各個(gè)臨床資料之間的相關(guān)性及相關(guān)程度。
　　結(jié)果：
　　1.與正常對(duì)照組相比，HLH組和非HLH感染

9、組患兒血清sCD163水平均有不同程度的升高，三組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=71.396，P＜0.05）。兩兩比較結(jié)果顯示，各組之間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；與正常對(duì)照組相比，HLH組和非 HLH感染組患兒血清 sCD25水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=37.513，P＜0.05），兩兩比較結(jié)果顯示，非HLH感染組與正常對(duì)照組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），其余各組比較差異有統(tǒng)計(jì)意義（P＜0.05）；并且血清sCD163和sCD2

10、5水平呈線性正相關(guān)，Pearson相關(guān)系數(shù)r=0.851（t=15.848，P＜0.05）。
　　2. HLH組不同的發(fā)病因素之間血清sCD163和sCD25水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；兩兩比較發(fā)現(xiàn)，腫瘤相關(guān)性HLH組血清 sCD163和sCD25水平較感染相關(guān)性HLH組明顯升高(P＜0.05)，而其余各組之間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P＞0.05)。
　　3.血清sCD163和sCD25水平隨著治療時(shí)間的延長和疾

11、病的好轉(zhuǎn)而呈下降趨勢（P＜0.05），而且相鄰兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)的下降差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　4.相關(guān)性分析結(jié)果顯示，HLH患兒血清sCD163水平與抽血當(dāng)日的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)及纖維蛋白原呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05），與谷丙轉(zhuǎn)氨酶、乳酸脫氫酶、血清鐵蛋白、甘油三酯、C反應(yīng)蛋白、降鈣素原及血清sCD25水平呈正相關(guān)(均P＜0.05)，而與其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)均無明顯相關(guān)性(均P＞0.05)。HLH患兒血清sCD25水

12、平與抽血當(dāng)日的白細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白、血小板計(jì)數(shù)及纖維蛋白原呈負(fù)相關(guān)（均P＜0.05），與乳酸脫氫酶、血清鐵蛋白、甘油三酯、C反應(yīng)蛋白、降鈣素原及血清sCD163水平呈正相關(guān)(均P＜0.05)。而與其他實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)均無明顯相關(guān)性(均P＞0.05)。
　　5.由ROC曲線可知，血清sCD163和sCD25水平用于診斷HLH具有較高的準(zhǔn)確性，當(dāng)血清sCD163的cut-off值為2359.08ng/ml時(shí)，診斷HLH的靈敏度為83.3％，

13、特異度為83.9%；當(dāng)血清sCD25的cut-off值為14901.024 pg/ml時(shí)，診斷HLH的靈敏度為76.2%，特異度為98.2%。
　　結(jié)論：
　　1.與血清sCD25類似，血清sCD163可用于HLH的診斷，對(duì)于懷疑HLH，未能達(dá)到診斷標(biāo)準(zhǔn)者可及早檢測血清sCD163，為進(jìn)一步明確診斷提供依據(jù)；
　　2.血清sCD163和sCD25水平可能為腫瘤相關(guān)性HLH與其他原因相關(guān)HLH的鑒別提供線索；