紫杉醇降低APC、DKK-3基因甲基化抑制Caski細胞增殖.pdf

1、目的：研究紫杉醇對APC、DKK-3基因甲基化水平的調(diào)控，及對宮頸癌Caski細胞增殖的影響，為DNA甲基化用于宮頸癌診斷和治療提供依據(jù)。
　　方法：紫杉醇濃度分別為0、1、5、10、20、40、80、160、320μmol/L處理宮頸癌Caski細胞株，MTT法繪制細胞生長；20μmol/L紫杉醇處理宮頸癌Caski細胞株，觀察不同時間點24 h、36h、48h對宮頸癌細胞的生長抑制作用；不同濃度紫杉醇分別處理宮頸癌Caski細

2、胞株，RT-PCR檢測APC、DKK-3 mRNA表達水平；20μmol/L紫杉醇處理宮頸癌Caski細胞株24 h、36h、48h后，RT-PCR檢測APC、DKK-3 mRNA表達水平；不同濃度紫杉醇分別處理宮頸癌Caski細胞株，甲基化特異性PCR檢測APC、DKK-3啟動子甲基化水平；20μmol/L紫杉醇處理宮頸癌Caski細胞株24 h、36h、48 h后，甲基化特異性PCR檢測APC、DKK-3啟動子甲基化水平。
　

3、　結(jié)果：1.當不同濃度紫杉醇處理Caski細胞24h后，細胞的抑制率隨著紫杉醇濃度的增加而抑制率呈上升趨勢，不同處理組之間抑制率差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。紫杉醇對Caski細胞的生長抑制具有劑量依賴效應(yīng)。
　　2．選取紫杉醇濃度為20μmol/ L，處理24 h、36h、48h后，對Caski細胞的抑制率分別為（51.1±1.5）％、（57.2±1.6）%、（64.7±2.1）%，在不同時間點之間的細胞抑制率比較差異有統(tǒng)計

4、學意義（P<0.01）。紫杉醇對Caski細胞的生長抑制有時間依賴效應(yīng)。
　　3.1μmol/L的紫杉醇作用時，APC、DKK-3 mRNA表達水平與未處理時比較，差異無統(tǒng)計學意義(p>0.05)；從5μmol/L開始，隨著紫杉醇濃度的增大，Caski細胞APC、DKK-3 mRNA表達水平明顯增加。
　　4.1μmol/L紫杉醇處理組，在24h、48h及72h時間點上，APC、DKK-3啟動子甲基化水平比較差異無統(tǒng)計學意義