我國(guó)非典型福氏志賀菌的表型和遺傳多態(tài)性研究.pdf

1、通過(guò)對(duì)我國(guó)大陸地區(qū)2003～2013年收集的1719株福氏志賀菌流行分布的回顧，可以看出，這11年間福氏志賀菌的流行以2a為主，其次是2v、1b、Yvariant、3a、4s、4y、1c、6、4a、5b和3b。值得注意的是，福氏志賀菌可通過(guò)不斷變換血清型的方式長(zhǎng)期流行，而非典型福氏志賀菌的流行對(duì)我國(guó)傳染病的監(jiān)測(cè)以及防控更是極大的挑戰(zhàn)。目前對(duì)非典型福氏志賀菌的相關(guān)研究較為匱乏，本研究旨在通過(guò)對(duì)非典型福氏志賀菌的表型和遺傳多態(tài)性研究深入了解

2、其生物學(xué)特性、進(jìn)化關(guān)系和流行特征，為菌痢防控策略的制定奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。生化實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，149株非典型福氏志賀菌(F2v、F1c、F4y、F4s、F1b)分解葡萄糖;對(duì)甘露醇，蔗糖，蜜二糖等的利用因不同亞型而異。值得注意的是，血清型為4y和4s的部分菌株可以產(chǎn)生吲哚。藥敏實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，多重耐藥菌的比例高達(dá)92.6％，另外，通過(guò)對(duì)各血清型不同時(shí)間和地區(qū)的耐藥譜比較，我們發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)2v對(duì)頭孢和喹諾酮類(lèi)藥物的耐藥率在2009年之后有了顯著地增長(zhǎng)

3、;而云南地區(qū)F1b的耐藥率比新疆地區(qū)高很多，這表明，同一血清型的耐藥率隨空間和時(shí)間都會(huì)有顯著改變，這提示我們應(yīng)持續(xù)地進(jìn)行耐藥性監(jiān)測(cè)，特別是一線用藥頭孢類(lèi)藥物和喹諾酮類(lèi)藥物的敏感性監(jiān)測(cè)，以便更好地指導(dǎo)臨床用藥。在耐頭孢類(lèi)的54株志賀菌中，檢測(cè)到的耐藥基因有blaTEM1，blaOXA1，blaCTX-M-14，blaCTX-M-3，blaCTX-M-79，intI1及其攜帶的基因盒blaOXA-30+aadA1與aacA4+cmlA1，i

4、ntI2及其攜帶的基因盒dfrA1+sat1+aadA1。在28株耐喹諾酮類(lèi)藥物的菌株中，所有菌株的ParC都發(fā)生了Ser80Ile突變; GyrA均有His211Tyr和Ser83Leu位點(diǎn)突變，部分菌株還有Asp87Asn/Gly突變。含有Asp87Asn突變的2株菌不僅對(duì)諾氟沙星耐藥，還對(duì)左氧氟沙星耐藥，因此我們推測(cè)，GyrA中Asp87Asn突變，可能介導(dǎo)對(duì)喹諾酮類(lèi)藥物高水平的耐藥。另外，24株菌中檢測(cè)到aac(6')-Ib-c

5、r基因，2株菌檢測(cè)到qnrS1基因。
　　本研究結(jié)合了3種分子分型方法MLST、PFGE和MLVA對(duì)149株菌進(jìn)行遺傳多態(tài)性分析，結(jié)果表明，所有的F1b和F1c菌株分別具有相同的序列型，ST104和ST100; F1c菌株有ST104和ST100兩種序列型;F4s菌株有ST99和ST100兩種序列型;F4y菌株有ST99、ST104、ST107和ST108四種序列型。所有菌株中，流行最多的序列型為ST100其次是ST104、ST9

6、9、ST108、ST107和ST105。ST100為優(yōu)勢(shì)的ST值，它與ST86的親緣關(guān)系最近，ST104次之。ST107與ST99和ST108都只有一個(gè)位點(diǎn)的差異。F2v作為一個(gè)新的亞型，它與F2a和F2b的親緣關(guān)系比較近;初步證明F2v是由F2a以及F2b進(jìn)化而來(lái)。F1c、F4s、F4y遺傳多態(tài)性明顯，其進(jìn)化可能來(lái)源于多個(gè)克隆系。總的看來(lái)，MLVA方法的分辨率與PFGE分型方法的分辨率基本一致，比MLST分型方法分辨率高，三者結(jié)合起來(lái)