肢體反復(fù)短暫缺血預(yù)處理對(duì)高脂血癥大鼠局灶性腦缺血再灌注后IL-6、JAK2、STAT3表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討肢體反復(fù)短暫缺血預(yù)處理對(duì)高脂血癥大鼠局灶性腦缺血/再灌注后腦組織IL-6、JAK2、STAT3表達(dá)的影響，以及肢體反復(fù)短暫缺血預(yù)處理對(duì)腦缺血/再灌注損傷時(shí)JAK2/STAT3信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的作用及肢體反復(fù)短暫缺血預(yù)處理可能的腦保護(hù)機(jī)制。
　　方法：高脂血癥大鼠建模:將SD大鼠100只采用隨機(jī)數(shù)值表分為2組:普通飼料喂養(yǎng)組10只，以普通飼料自由喂養(yǎng);高脂飼料喂養(yǎng)組90只，以高脂飼料自由喂養(yǎng)。模型制備時(shí)間為4周。造模完成后，禁

2、食10h，取大鼠尾尖靜脈血，所采靜脈血離心后使用全自動(dòng)生化儀檢測(cè)大鼠血脂指標(biāo):總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度膽固醇(HDL-C)、低密度膽固醇(LDL-C)，對(duì)兩組大鼠間各項(xiàng)血脂指標(biāo)進(jìn)行比較。將造模成功的90只高脂血癥大鼠隨機(jī)分為3組:假手術(shù)組(30只)，腦缺血再灌注組（30只），肢體缺血預(yù)處理組（30只）。假手術(shù)組:麻醉大鼠后，分別將其右側(cè)頸總動(dòng)脈、頸內(nèi)動(dòng)脈、頸外動(dòng)脈暴露、分離，但大腦中動(dòng)脈中不插入栓線，保持血流通暢，再依

3、次縫合。腦缺血再灌注模型組:根據(jù)Longa的線栓法制備大腦中動(dòng)脈缺血再灌注(MCAO)模型，大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈于線栓阻斷2小時(shí)后行再灌注。肢體缺血預(yù)處理組:制備LIP模型后即刻進(jìn)行大腦中動(dòng)脈栓塞模型的制備，給予阻斷大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈2小時(shí)后進(jìn)行再灌注。各模型組于再灌注后6h、12h、24h、48h、72h5個(gè)時(shí)間點(diǎn)分為5個(gè)亞組，每個(gè)亞組5只大鼠。于上述5個(gè)對(duì)應(yīng)時(shí)間點(diǎn)，對(duì)各組大鼠行神經(jīng)功能缺損評(píng)分、干濕重法測(cè)定各組大鼠腦組織含水量、HE染

4、色觀察各組大鼠腦組織病理改變、免疫組織化學(xué)方法觀察IL-6、JAK2、STAT3的動(dòng)態(tài)表達(dá)。此外，各組均于再灌注24h時(shí)間點(diǎn)，再增加5只大鼠以TTC染色法測(cè)量腦梗死體積。
　　結(jié)果：⑴高脂飼料喂養(yǎng)組的總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白膽固醇明顯高于普通飼料喂養(yǎng)組(P＜0.01)。⑵在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，假手術(shù)組均未出現(xiàn)明顯神經(jīng)功能障礙;腦缺血再灌注組和肢體缺血預(yù)處理組都出現(xiàn)程度不等的神經(jīng)功能缺損，但肢體缺血預(yù)處理組神經(jīng)功能損傷評(píng)分與相應(yīng)時(shí)間

5、點(diǎn)腦缺血再灌注組比較，顯著高于腦缺血再灌注組(P＜0.01)。⑶TTC染色、腦梗死體積:假手術(shù)組高脂血癥大鼠的腦組織呈現(xiàn)均勻一致的紅色，顏色正常，形態(tài)較為規(guī)則，未觀察到腫脹與蒼白狀態(tài)，再灌后24h時(shí)未出現(xiàn)腦梗死病灶;而腦缺血再灌注組與肢體缺血預(yù)處理組在腦缺血再灌注24h的腦組織中可以清晰的觀察到邊界較為清晰、顏色為蒼白色、大小不等的腦組織缺血梗死病灶。在腦缺血再灌注24h時(shí)，腦缺血再灌注組大鼠腦梗死體積顯著大于假手術(shù)組(P＜0.01)，

6、肢體缺血預(yù)處理組大鼠腦梗死體積顯著低于腦缺血再灌注模型組(P＜0.01)。⑷在各個(gè)時(shí)間點(diǎn)，假手術(shù)組大鼠腦組織含水量無(wú)明顯增加;腦缺血再灌注組大鼠腦組織含水量顯著高于假手術(shù)組(P＜0.01);缺血預(yù)處理組大鼠腦組織含水量顯著低于腦缺血再灌注組(P＜0.05)。⑸在再灌注6h、12h、24h、48h、72h時(shí)間點(diǎn)，腦缺血再灌注組大鼠腦組織白介素-6陽(yáng)性細(xì)胞均顯著高于假手術(shù)組;在再灌注各時(shí)間點(diǎn)，肢體缺血預(yù)處理組大鼠腦組織白介素-6陽(yáng)性細(xì)顯著低

7、于腦缺血再灌注組(P＜0.01)。⑹在再灌注6h、12h、24h、48h、72h時(shí)間點(diǎn)，假手術(shù)組未見(jiàn)JAK2、STAT3免疫陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá);腦缺血再灌注組大鼠腦組織JAK2、STAT3免疫陽(yáng)性細(xì)胞均顯著高于假手術(shù)組(P＜0.01);在再灌注各時(shí)間點(diǎn)，肢體缺血預(yù)處理組大鼠腦組織JAK2、STAT3免疫陽(yáng)性細(xì)胞顯著低于腦缺血再灌注組(P＜0.01)。
　　結(jié)論：①高脂血癥大鼠發(fā)生局灶性腦組織缺血再灌注損傷后會(huì)導(dǎo)致神經(jīng)功能缺損、腦組織含