去整合素echistatin對(duì)糖尿病兔晶狀體摘除術(shù)后晶體上皮細(xì)胞α-SMA蛋白、Ⅳ膠原表達(dá)的影響.pdf

1、目的:后發(fā)性白內(nèi)障(PCO)是糖尿病性白內(nèi)障患者術(shù)后最常見的眼部并發(fā)癥，目前醫(yī)學(xué)界認(rèn)為，白內(nèi)障術(shù)后產(chǎn)生的細(xì)胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)會(huì)造成囊膜的混濁。去整合素(disintegrin)是一類小分子多肽，能夠和廣泛存在于各種細(xì)胞表面的整合素特異性結(jié)合，進(jìn)而阻止細(xì)胞外基質(zhì)和整合素的粘附。本課題組的前期研究發(fā)現(xiàn)糖尿病兔眼晶狀體摘除術(shù)(ECLE)后10天為PCO出現(xiàn)的最早時(shí)間，6周達(dá)到最高峰。去整合素echist

2、atin對(duì)體外培養(yǎng)的晶狀體上皮細(xì)胞(LECs)的增值，黏附及移形有明顯的抑制作用，且10ug/ml的echistatin在對(duì)后發(fā)性白內(nèi)障的發(fā)生發(fā)展具有抑制作用，且未見對(duì)眼內(nèi)組織有明顯損傷。為進(jìn)一步探索echistatin抑制糖尿病兔PCO發(fā)展的機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)采用Western blotting法，觀察在去整合素echistatin干預(yù)下糖尿病兔眼PCO模型中晶狀體后囊膜上α-SMA、Ⅳ膠原蛋白的改變。
　　方法:常規(guī)建立48只大白兔

3、糖尿病模型后，人為選擇右眼做為手術(shù)眼，并實(shí)施晶狀體囊外摘除術(shù)(extracapsular lens extraction，ECLE)。術(shù)中隨機(jī)分為兩組（對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組）。其中，A組和B組為術(shù)后6周對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組，C組和D組為術(shù)后10天對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組。每組12只兔。對(duì)照組A、C兔眼囊袋內(nèi)注入0.2ml蒸餾水，實(shí)驗(yàn)組B、D注入等量濃度為10ug/ml的echistatin。術(shù)后每組隨機(jī)抽取4只兔子觀察PCO分級(jí)后，分別于術(shù)后第10天及第6周

4、處死，立刻取出眼球，分離后囊膜組織，應(yīng)用WesternBlotting技術(shù)檢測(cè)兔后囊膜組織中α-SMA蛋白和Ⅳ膠原表達(dá)量。
　　結(jié)果: 1.PCO分級(jí)。術(shù)后10天兩組糖尿病兔PCO分級(jí)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.273)，但術(shù)后6周時(shí)實(shí)驗(yàn)各組PCO分級(jí)較對(duì)照組明顯降低(p=0.049)。
　　2.α-SMA蛋白和Ⅳ膠原均有表達(dá)。α-SMA蛋白A組的相對(duì)灰度值為0.419±0.084，B組為0.273±0.096，C組為0.12

5、2±0.026，D組為0.077±0.016。Ⅳ膠原A組的相對(duì)灰度值為341.983±0.935，B組為89.614±1.135，C組為70.392±1.046，D組為46.526±0.763。
　　3.術(shù)后10天α-SMA實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組均有少量蛋白表達(dá)，但是兩組間的結(jié)果并沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.267)，術(shù)后6周實(shí)驗(yàn)組α-SMA蛋白表達(dá)明顯低于對(duì)照組(p=0.029)。術(shù)后10天實(shí)驗(yàn)組晶狀體后囊膜上Ⅳ膠原蛋白表達(dá)較對(duì)照組減少(P