6-OHDA誘導(dǎo)的帕金森病大鼠模型腦中TNF-α、IL-6、NF-κB的改變.pdf

1、帕金森病(Parkinson’sdisease,PD)為一種困擾許多中老年人的常見病,至今還沒有一種有效的治療方法能阻止該病的進展。近年來,隨著對該疾病研究的深入,免疫炎癥機制已成為研究PD發(fā)病機制的又一熱點,一系列炎癥反應(yīng)因子,包括TNF-α、IL-1β、IL-6、NF-κB等,均在PD患者的腦脊液中或受影響的腦區(qū)被發(fā)現(xiàn)有所改變。目前對帕金森病的應(yīng)用基礎(chǔ)研究多廣泛采用6-OHDA誘導(dǎo)的PD大鼠模型,該模型是否能夠模擬炎癥過程,即其黑質(zhì)

2、多巴胺能神經(jīng)元損傷過程是不是同樣存在與人類患者相似的炎癥過程,目前尚無明確證據(jù)。因此,本實驗研究觀察該模型中重要的炎癥因子,TNF-α、IL-6、NF-κB水平的改變,為采用該模型研究PD的發(fā)病機制及治療方法提供依據(jù)。
　　1、方法:
　　(1)取SD(SpragueDawley)大鼠,隨機分成實驗組與對照組,每組又分1,7,14,21d亞組,在實驗組大鼠左側(cè)紋狀體內(nèi)注射6-OHDA,對照組注射等量生理鹽水;
　　(2

3、)術(shù)后各時間點觀察各亞組經(jīng)阿樸嗎啡(Apomorphine,APO)誘導(dǎo)后大鼠旋轉(zhuǎn)行為的改變;
　　(3)術(shù)后各時間點各亞組取腦組織行免疫組織化學(xué)染色,觀察黑質(zhì)多巴胺(dopamine,DA)能神經(jīng)元數(shù)量變化;
　　(4)術(shù)后各時間點各亞組用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定大鼠中腦黑質(zhì)組織勻漿中TNF-α、IL-6的水平;
　　(5)術(shù)后各時間點各亞組行腦組織行免疫組織化學(xué)染色觀察紋狀體NF-κBp65的表達改變。

4、r>　　2、結(jié)果:
　　(1)成功構(gòu)建6-OHDA誘導(dǎo)的PD大鼠模型;
　　(2)實驗組大鼠術(shù)后7d出現(xiàn)不同程度向健側(cè)緩慢旋轉(zhuǎn)(3.25±0.76)次/分,14d旋轉(zhuǎn)次數(shù)增多(8.42±1.25)次/分,21d達到高峰(11.98±2.52)次/分;對照組各時間點均未發(fā)現(xiàn)向健側(cè)旋轉(zhuǎn);
　　(3)實驗組注射側(cè)黑質(zhì)酪氨酸羥化酶(Tyrosinehydroxylase,TH)陽性神經(jīng)元數(shù)量1,7,14,21d組較對照組明顯下

5、降(P<0.01),且其數(shù)目的減少隨時間延長而愈加顯著,21d時下降到最低;
　　(4)實驗組從6-OHDA注射后1d始到21dTNF-α、IL-6水平較對照組持續(xù)增高;
　　(5)實驗組從6-OHDA注射后1d始到21dNF-κBp65的表達較對照組持續(xù)增強。
　　3、結(jié)論:
　　在6-OHDA誘導(dǎo)的帕金森病大鼠模型中炎癥因子TNF-α、IL-6、NF-κB的表達升高,這種升高很可能參與腦黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元的損