探討轉(zhuǎn)錄因子Mitf在神經(jīng)視網(wǎng)膜退行性病變中的功能.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：MITF在多種細(xì)胞包括視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的發(fā)育和功能發(fā)揮著重要的作用。Mitf基因突變后小鼠出現(xiàn)小眼畸形，RPE細(xì)胞的發(fā)育異常以及神經(jīng)視網(wǎng)膜變性。本研究對(duì)Mitf在神經(jīng)視網(wǎng)膜退行性病變過程中的功能進(jìn)行了探討。
　　方法：利用ERG檢測(cè)成年Mitf-/-小鼠的視功能，通過HE染色檢測(cè)神經(jīng)視網(wǎng)膜外核層的厚度變化，通過視網(wǎng)膜鋪片免疫熒光檢測(cè)神經(jīng)視網(wǎng)膜感光細(xì)胞的數(shù)目變化，通過冰凍切片免疫熒光檢測(cè)視網(wǎng)膜外核層細(xì)胞的凋亡情況，確定神經(jīng)視

2、網(wǎng)膜的退行性病變過程。使用WT和Mitf-/-的視網(wǎng)膜與RPE組合培養(yǎng)確定是否因?yàn)镸itf-/-RPE功能的改變導(dǎo)致的神經(jīng)視網(wǎng)膜退行性病變。篩選成熟的RPE表達(dá)的神經(jīng)營養(yǎng)因子，并驗(yàn)證其對(duì)Miif-/-視網(wǎng)膜退行性病變是否具有挽救作用。
　　結(jié)果：ERG檢測(cè)成年Mitf-/-小鼠視功能發(fā)現(xiàn)其神經(jīng)視網(wǎng)膜的視功能缺陷。組織形態(tài)學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Mitf/-神經(jīng)視網(wǎng)膜發(fā)生了退行性病變，外顆粒層厚度逐漸變薄，感光細(xì)胞發(fā)生凋亡，數(shù)目變少。通過DCT免

3、疫熒光明確出生后10天Mitf-/-小鼠的RPE仍然存在。通過視網(wǎng)膜與RPE組合培養(yǎng)確定WT的RPE可以部分挽救Mitf-/-的神經(jīng)視網(wǎng)膜退行性病變。通過篩選的在Mitf-/-RPE中低表達(dá)的生長因子，對(duì)Mitf-/-的神經(jīng)視網(wǎng)膜在體外進(jìn)行培養(yǎng)，發(fā)現(xiàn)PEDF對(duì)Mitf-/-的神經(jīng)視網(wǎng)膜退行性變性具有一定的挽救效應(yīng)。
　　結(jié)論：Mitf-/-RPE功能異常可能與Mitf-/-小鼠神經(jīng)視網(wǎng)膜的退行性變性相關(guān)。RPE分泌的神經(jīng)營養(yǎng)因子包

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