姜黃素對(duì)汞致大鼠腎損傷保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　汞是一種在環(huán)境中分布廣泛重金屬污染物，屬高毒物質(zhì)，能夠?qū)C(jī)體多器官及系統(tǒng)造成損傷。汞還可通過(guò)在環(huán)境介質(zhì)內(nèi)的轉(zhuǎn)移和轉(zhuǎn)化對(duì)全球環(huán)境造成影響。在全球范圍內(nèi)，我國(guó)的汞使用量居于首位，同時(shí)我國(guó)也是全球汞污染最為嚴(yán)重的區(qū)域之一。目前由環(huán)境汞污染進(jìn)而引起的人體健康危害已受到廣泛關(guān)注。無(wú)機(jī)汞進(jìn)入機(jī)體后主要在腎臟蓄積并對(duì)腎臟造成損傷，有研究表明，氧化應(yīng)激汞為所致腎臟損傷的主要原因之一。姜黃素是一種從姜科植物姜黃根莖中提取出的天然色素，是

2、調(diào)味料咖喱的主要成分，在日常生活中應(yīng)用廣泛。與此同時(shí)，姜黃素因其較高抗氧化能力及自由基清除作用受到研究者廣泛關(guān)注。目前還少有研究涉及姜黃素對(duì)汞致大鼠腎損傷保護(hù)作用。本研究通過(guò)觀察姜黃素對(duì)染汞大鼠腎損傷相關(guān)指標(biāo)的改善情況，為進(jìn)一步研究汞致腎損傷的毒作用機(jī)理提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)，并為汞中毒的防治提供新的思路。
　　方法：
　　由中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的健康成年清潔級(jí)Wistar大鼠72只，體重170±10g，雌雄各半，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物許可

3、證號(hào)為SYXK（遼）2008-0005。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物室溫度17～23℃，相對(duì)濕度45％～55％，正式實(shí)驗(yàn)前適應(yīng)性飼養(yǎng)7天，動(dòng)物飼料由實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。將實(shí)驗(yàn)大鼠按體重隨機(jī)分為6組，每組12只，雌雄各半。分別為對(duì)照組、DMSO對(duì)照組、低劑量染汞組、中劑量染汞組、高劑量染汞組和高劑量染汞+姜黃素干預(yù)組。染毒前，對(duì)照組及各劑量染汞組皮下注射生理鹽水，DMSO對(duì)照組注射1％ DMSO，姜黃素干預(yù)組皮下注射100mg/kg的姜黃素，注射容量均為1ml

4、/kg。2h后，對(duì)照組、DMSO對(duì)照組腹腔注射生理鹽水，各劑量染汞組及姜黃素干預(yù)組分別腹腔注射2.2、4.4、8.8和8.8μmol/kg的氯化汞溶液，注射容量5ml/kg。連續(xù)干預(yù)及染毒3天。末次染毒2h后，每組取6只大鼠，置于代謝籠，收集24 h尿液，用于測(cè)定尿汞，尿蛋白含量以及乳酸脫氫酶(LDH)、堿性磷酸酶(ALP)、β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶NAG的活力。乙醚麻醉大鼠，腹主動(dòng)脈采血，3000r/min離心取血清用于測(cè)定血清尿素

5、氮的含量，并于冰浴下準(zhǔn)確切取腎皮質(zhì)并制備單細(xì)胞懸液用于測(cè)定ROS含量及細(xì)胞凋亡壞死率。處死剩余36只大鼠，切取腎臟并除去被膜，制備勻漿用于測(cè)定腎皮質(zhì)細(xì)胞MDA和GSH含量、GSH-Px和SOD活力，Nrf2、HO-1、γ-GCS、GPx-1 mRNA及蛋白表達(dá)水平。
　　結(jié)果：
　　與對(duì)照組比較，隨染汞劑量的增加，大鼠尿汞，腎皮質(zhì)汞含量成上升趨勢(shì)，尿蛋白含量、尿LDH、ALP及NAG活力逐漸升高，血清BUN含量逐漸升高，腎皮

6、質(zhì)細(xì)胞GSH含量逐漸升高，GSH-Px和SOD含量逐漸降低，MDA含量逐漸升高，腎皮質(zhì)細(xì)胞內(nèi)ROS水平逐漸升高，腎皮質(zhì)細(xì)胞凋亡率逐漸升高，Nrf2、HO-1、γ-GCS mRNA及蛋白表達(dá)水平逐漸升高，GPx-1mRNA及蛋白表達(dá)水平逐漸降低。姜黃素干預(yù)后，與高汞組比較，大鼠尿蛋白含量、尿LDH、ALP及NAG活力顯著降低，血清BUN含量顯著降低，腎皮質(zhì)細(xì)胞GSH含量顯著降低，GSH-Px和SOD活力升高，MDA含量顯著降低，腎皮質(zhì)細(xì)胞