補(bǔ)陽(yáng)還五湯及黃芪紅花“益氣活血”功效物質(zhì)基礎(chǔ)的移行分析.pdf

1、中風(fēng)是目前威脅中老年人健康且致殘致死率高、并發(fā)癥多的疾病之一，其中以缺血性中風(fēng)最為常見(jiàn)。中醫(yī)認(rèn)為缺血性中風(fēng)的病理機(jī)制為氣虛血瘀。補(bǔ)陽(yáng)還五湯出自清代名醫(yī)王清任的《醫(yī)林改錯(cuò)》，作為治療缺血性中風(fēng)的經(jīng)典方劑，其主要功效為補(bǔ)氣活血。目前研究發(fā)現(xiàn)補(bǔ)陽(yáng)還五湯中起補(bǔ)氣活血作用的主要藥味是為黃芪和紅花，其主要有效成分為黃芪甲苷和羥基紅花黃色素A。為揭示補(bǔ)陽(yáng)還五湯治療缺血性中風(fēng)的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，本研究選取補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒為研究對(duì)象，運(yùn)用體內(nèi)藥物分析方法，

2、測(cè)定大鼠體內(nèi)代謝前后補(bǔ)陽(yáng)還五湯主要有效成分黃芪甲苷和羥基紅花黃色素A的含量變化，為闡明補(bǔ)陽(yáng)還五湯主要功效“益氣活血”的物質(zhì)基礎(chǔ)提供參考依據(jù)。
　　研究目的
　　1.建立方便可靠的黃芪甲苷和羥基紅花黃色素A的含量測(cè)定方法，分別測(cè)定補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒及單味藥在大鼠體內(nèi)代謝后的主要有效成分的含量。
　　2.比較大鼠體內(nèi)代謝前后有效成分黃芪甲苷和羥基紅花黃色素A的含量變化，確定復(fù)方配伍對(duì)補(bǔ)陽(yáng)還五湯藥效的影響，以闡明補(bǔ)陽(yáng)還五湯益

3、氣活血的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。
　　研究方法
　　1、通過(guò)對(duì)色譜條件、樣品制備及前處理方法的優(yōu)化，以及方法學(xué)考察，建立高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法和高效液相色譜-紫外檢測(cè)法，測(cè)定補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒、黃芪和紅花藥材中的黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A含量的方法，同時(shí)，驗(yàn)證本實(shí)驗(yàn)方法的可行性、精密度、準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性。
　　2、將大鼠隨機(jī)分為補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒組、黃芪組和紅花組，分別根據(jù)換算得到的臨床等效劑量灌胃給藥，補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒

4、溶液、黃芪水煎液和紅花水煎液均為10ml/kg，連續(xù)給藥8d后取含藥血清和含藥腦脊液樣品進(jìn)行含量測(cè)定；其中，灌胃3d后入代謝籠，分別收集尿液和糞便樣品進(jìn)行含量測(cè)定。比較大鼠體內(nèi)代謝前后黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A濃度的變化，探討補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒益氣活血功效的物質(zhì)基礎(chǔ)與黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A含量變化的關(guān)系。
　　研究結(jié)果
　　1.本實(shí)驗(yàn)建立的含量測(cè)定方法為高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法測(cè)定黃芪甲苷和高效液相色譜-紫外檢測(cè)法

5、測(cè)定羥基紅花黃色素A的含量，該方法簡(jiǎn)便易操作、快捷且成本小。
　　2.經(jīng)體內(nèi)代謝后含藥腦脊液、含藥尿液及含藥糞便中有效成分黃芪甲苷和羥基紅花黃色素A的含量較低，其中單味藥組均高于復(fù)方組。
　　3.檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)體內(nèi)代謝后補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒組含藥血清中有效成分黃芪甲苷的含量遠(yuǎn)高于黃芪組；同時(shí)發(fā)現(xiàn)補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒組含藥血清中有效成分黃芪甲苷的含量為原配方顆粒中的10％，黃芪組含藥血清中有效成分黃芪甲苷的含量為原藥材水煎液中的

6、4%，因此經(jīng)體內(nèi)代謝后補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒有效成分黃芪甲苷的含量下降幅度遠(yuǎn)低于黃芪單味藥。
　　4.檢測(cè)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，經(jīng)體內(nèi)代謝后補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒組含藥血清中有效成分羥基紅花黃色素A的含量遠(yuǎn)高于紅花組；同時(shí)發(fā)現(xiàn)補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒組含藥血清中有效成分羥基紅花黃色素 A的含量為原配方顆粒中的1.2%，而紅花組含藥血清中有效成分羥基紅花黃色素 A的含量為原藥材水煎液中的0.6%，因此經(jīng)體內(nèi)代謝后補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒有效成分羥基紅花黃色素A含量

7、變化下降幅度遠(yuǎn)低于紅花單味藥。
　　研究結(jié)論
　　1、本研究建立的高效液相色譜-蒸發(fā)光散射檢測(cè)法和高效液相色譜-紫外檢測(cè)法，測(cè)定補(bǔ)陽(yáng)還五湯配方顆粒中的黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A，以及黃芪和紅花中的黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A的含量，該測(cè)定方法線(xiàn)性關(guān)系、回收率、精密度和穩(wěn)定性良好，表明該方法操作簡(jiǎn)便、靈敏度高且雜質(zhì)干擾小。
　　2、對(duì)含藥腦脊液含量檢測(cè)可推斷復(fù)方配伍可以降低有效成分黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A腦中的濃度，防止

8、短期內(nèi)過(guò)多的有效成分對(duì)急性腦卒中損害，同時(shí)起到了該方“祛瘀而不傷正”原理。對(duì)含藥尿液及含藥糞便含量檢測(cè)發(fā)現(xiàn)復(fù)方組有效成分黃芪甲苷、羥基紅花黃色素A的濃度低于單味藥組，說(shuō)明復(fù)方配伍能夠降低有效成分的代謝，對(duì)維持功效有促進(jìn)作用。
　　3、補(bǔ)陽(yáng)還五湯復(fù)方顆粒組體內(nèi)代謝后有效成分黃芪甲苷和羥基紅花黃色素A的濃度高于單味藥材組，而且下降幅度較低，說(shuō)明復(fù)方配伍能夠?qū)Ψ街杏行С煞值暮烤S持起到一定的作用，使得復(fù)方的療效遠(yuǎn)高于單味藥材的作用，說(shuō)明