健脾疏肝抗毒方對三陰性乳腺癌異種移植瘤生長及轉(zhuǎn)移的影響.pdf

1、研究目的:
　　研究健脾疏肝抗毒方對三陰性乳腺癌荷瘤鼠抗腫瘤作用及其可能的機制。研究
　　方法:
　　應(yīng)用Fugene HD Transfection Reagent轉(zhuǎn)染乳腺癌MDA-MB-231細胞，經(jīng)G418篩選獲得穩(wěn)定表達綠色熒光蛋白的乳腺癌細胞(MDA-MB-231-pAcGFP)。流式細胞儀檢測熒光細胞百分率。采用皮下接種法建立MDA-MB-231-pAcGFP細胞異種移植瘤裸鼠，觀察移植瘤的生長情況，熒光成

2、像技術(shù)觀察各臟器轉(zhuǎn)移瘤的數(shù)目和大小。應(yīng)用免疫組化法檢測不同空白組別:對照組（A組）、健脾疏肝抗毒方組(B組）、ADM3100（CXCR4抑制劑）組（C組）、健脾疏肝抗毒方聯(lián)合ADM3100組（D組）腫瘤微環(huán)境中的腫瘤相關(guān)巨噬細胞、腫瘤相關(guān)成纖維細胞浸潤，蛋白印跡方法檢測各組腫瘤組織CXCR4/CXCL12軸相關(guān)分子的表達。
　　研究結(jié)果:
　　流式細胞儀檢測乳腺癌細胞轉(zhuǎn)染率高達96.5％，表達有綠色熒光蛋白的MDA-MB-2

3、31-pAcGFP細胞成瘤率為100％。對照組（A組）、健脾疏肝抗毒方組（B組）、CXCR4抑制劑組（C組）、健脾疏肝抗毒方聯(lián)合CXCR4抑制劑組(D組）。瘤體平均重量分別為:1.30±0.11g，0.75g±0.12g，0.48g±0.09g，0.44g±0.07g，瘤體平均體積分別為:6.635±0.5cm3，4.017±0.466cm3，2.664±0.7 cm3，2.323±0.492 cm3(P＜0.05)。三組的抑瘤率分別為

4、42.18％、62.95％、66.28％。A組、C組肝臟可見散在熒光轉(zhuǎn)移結(jié)節(jié)，B組及D組肝臟未見有熒光結(jié)節(jié)。健脾疏肝抗毒方能顯著抑制腫瘤微環(huán)境中腫瘤相關(guān)巨噬細胞、腫瘤相關(guān)成纖維細胞的浸潤，抑制CXCR4/CXCL12軸相關(guān)分子CXCR4、CXCL12、HIFα，NF-κB，VEGF的表達，且與ADM3100聯(lián)合后抑制作用顯著增強。
　　結(jié)論:
　　健脾疏肝抗毒方可以通過改變腫瘤微環(huán)境，調(diào)節(jié)CXCR4/CXCL12軸相關(guān)分子的