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文檔簡介
1、Shewanella oneidensis在分類學(xué)上屬于γ-變形菌綱,作為一種兼性厭氧型細(xì)菌,S.oneidensis以其呼吸底物的多樣性而聞名,此外,該菌還具有對多種β-內(nèi)酰胺類抗生素的天然抗性。實驗室前期研究發(fā)現(xiàn)β-內(nèi)酰胺酶BlaA的誘導(dǎo)表達(dá)是其具有抗性的原因。對Escherichia coli的研究發(fā)現(xiàn),溶菌糖基轉(zhuǎn)移酶(lytictransglycosylase,LT)能催化產(chǎn)生可誘導(dǎo)β-內(nèi)酰胺酶表達(dá)的小分子,它們的缺失使細(xì)菌抗性
2、減弱。為了探究S.oneidensis中LTs在β-內(nèi)酰胺酶表達(dá)過程中的作用,本文對相關(guān)分子機制進(jìn)行了研究。
S.oneidensis中存在七個LTs,分別為SltY、MltB1、MltB2、MltC、MltD1、MltD2和MltF。單一酶的缺失不會改變細(xì)胞形態(tài),但MItF、MltB2或SltY的缺失會使突變株生長變慢。
與E.coli不同,S.oneidensis中SltY、MltB1或者M(jìn)ltB2的缺失能增加對
3、β-內(nèi)酰胺類抗生素的抗性,這種抗性的增強與blaA有關(guān)。進(jìn)一步研究顯示這種抗性在雙突菌株ΔmltBlΔmltB2和ΔmltB2ΔsltY中具有疊加效應(yīng)。
結(jié)合野生型菌株中LTs的表達(dá)情況,我們認(rèn)為S.oneidensis中LTs的具體分工可能有所不同,導(dǎo)致它們在維持細(xì)胞正常的生長與blaA的誘導(dǎo)表達(dá)過程中作用不同。MltF和MltB1分別在細(xì)胞生長和blaA表達(dá)中發(fā)揮作用而MltB2和SltY則同時在上述過程發(fā)揮作用。
4、 前期研究發(fā)現(xiàn)ΔmrcA和ΔampG都具有很強的β-內(nèi)酰胺類抗生素抗性,但BlaA在ΔampG中是誘導(dǎo)酶,而在ΔmrcA中是組成酶。因此我們對LTs缺失突變株中blaA的表達(dá)與MrcA或AmpG介導(dǎo)的blaA表達(dá)通路的關(guān)系開展了研究。發(fā)現(xiàn)blaA的表達(dá)在ΔmltB2Δslt YΔmrcA中能夠被氨芐青霉素誘導(dǎo),而在ΔmltB1ΔmltB2ΔmrcA中不能被誘導(dǎo),而且Δslt YΔmrcA與ΔmrcA的BlaA活性相似,都不受到氨芐青霉
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