1例自身免疫性多內(nèi)分泌腺病綜合征Ⅰ型患者的臨床及家系A(chǔ)IRE基因突變分析.pdf

1、背景：自身免疫性多內(nèi)分泌腺病綜合征Ⅰ型（APSⅠ）是一種單基因常染色體隱性遺傳性疾病，其致病基因為自身免疫調(diào)節(jié)因子（AIRE）基因，基因突變致編碼的AIRE蛋白功能缺陷，導(dǎo)致以自身免疫性甲狀旁腺功能減退、原發(fā)性腎上腺皮質(zhì)功能減退和慢性皮膚黏膜念珠菌病為主要表現(xiàn)的綜合征，又稱自身免疫性多發(fā)性內(nèi)分泌病-念珠菌病-外胚層營養(yǎng)不良。目前，人類基因突變數(shù)據(jù)庫收錄 AIRE基因突變有117種，包括插入和缺失、沉默突變、錯義突變、無義突變及剪接位點突

2、變等。國內(nèi)APSI少見，AIRE基因突變報道較少。
　　目的：對1例APSⅠ患者的臨床特點進(jìn)行描述，并對其及父母的AIRE基因進(jìn)行突變檢測，并用生物信息學(xué)軟件對其功能進(jìn)行預(yù)測，以明確基因診斷。
　　方法：⑴收集1例自身免疫性多內(nèi)分泌腺病綜合征Ⅰ型患者的臨床資料。⑵外周血基因組提取試劑盒提取先證者及父母外周血基因組 DNA，聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）擴增自身免疫調(diào)節(jié)因子（AIRE）基因的14個外顯子，Sanger DNA測序法對

3、所得外顯子片段進(jìn)行雙向測序。⑶同時選取50名無血緣關(guān)系的正常對照人群，對新突變位點所在外顯子進(jìn)行檢測，以排除基因的多態(tài)性。⑷使用生物信息學(xué)軟件（Polyphen2、SNPs3D、SIFT）對新發(fā)現(xiàn)的突變的蛋白功能影響進(jìn)行預(yù)測。
　　結(jié)果：①本例患者先后3年里出現(xiàn)頑固性口腔黏膜念珠菌感染、原發(fā)性甲狀旁腺功能減退，臨床符合 APSⅠ診斷。②先證者AIRE基因有一處雜合突變：第5外顯子622位 G→ T，密碼子由GGG→ TGG，致第2

4、08位氨基酸由甘氨酸變成色氨酸（Gly→ Trp，G208W），而先證者的雙親均未發(fā)現(xiàn)此突變。且此突變以往未有報道，為新發(fā)現(xiàn)的突變。③未在50名無血緣關(guān)系的健康人群中檢測到c.622G＞T突變，可基本排除此突變?yōu)槎鄳B(tài)性位點。④Polyphen2軟件對 c.622G＞T突變進(jìn)行功能預(yù)測，分?jǐn)?shù)為1.00（范圍0.00-1.00，分?jǐn)?shù)越高說明突變損害可能性越大）,且此突變所在位點在多物種中高度保守性；SNPs3D軟件對其功能預(yù)測，分?jǐn)?shù)為-2.