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文檔簡介
1、核酸適體作為一段寡核苷酸序列,具有親和力高、特異性強、穩(wěn)定性好、免疫原性低等特點,其在靶向藥物、生物傳感器、藥物分離臨床診斷等方面有廣闊的應用前景。
本課題利用EAQ3和B2兩條對細菌內毒素表現(xiàn)了親和力的序列特異性結合內毒素,達到分離去除內毒素的目的。通過PCR技術擴增EAQ3和B2序列,用擴增的得到的序列構建核酸適體-磁珠體系和核酸適體-膜體系,對兩條序列的親和力進行比對并進行內毒素分離操作。
通過DNAMAN6.
2、0.3.99對兩條序列進行二級結構分析,結果表明兩條序列均形成了莖環(huán)結構,且所形成的環(huán)狀結構數(shù)相同。對PCR體系和條件進行探索后擴增得到了EAQ3和B2序列的ssDNA。利用擴增得到的ssDNA制備核酸適體-磁珠體系,經(jīng)過吸附動力學曲線擬合,EAQ3和B2序列在10分鐘內對內毒素的吸附量分別達到1207 EU/g和991 EU/g,吸附效果良好,過程快速。核酸適體-膜體系分離內毒素的實驗中,EAQ3和 B2序列的最高吸附量也分別達到了1
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