基于核酸適體的腺苷檢測新方法及應用研究.pdf

1、腺苷是一種內源性核苷，能參與血管神經舒張活動，具有抗心律失常的功效。因其在中樞神經和周圍神經系統(tǒng)信號表達中的重要作用，腺苷受到廣泛關注。另外，大量的研究表明，實體瘤細胞因其快速生長導致缺氧和壞死，導致腺嘌呤核苷酸降解釋放大量腺苷。釋放的腺苷又為腫瘤的快速生長提供了環(huán)境，從而導致更高濃度的腺苷在實體瘤中蓄積。尿中的腺苷水平反映了機體中腺嘌呤核苷酸的降解水平。一些研究證實了腺苷作為腫瘤的潛在生物標志物的重要意義，尿腺苷還被用來檢測疾病的病程

2、。此外，在生理狀態(tài)下直接監(jiān)測腺苷波動在心、腦生理功能的研究中扮演著不可忽視的角色。目前已建立的腺苷檢測方法大多數(shù)存在儀器設備昂貴、操作費時且需要復雜的樣本前處理等缺陷，因此建立腺苷檢測新方法有著重要的現(xiàn)實意義。
　　本文第二章基于腺苷與其適體特異性識別和腺苷適體偶聯(lián)金納米粒子自組裝導致共振光散射信號放大建立了腺苷檢測新方法。研究表明：在磷酸緩沖溶液中，腺苷與腺苷適體特異性結合，打開適體-DNA雙鏈體結構開關，形成G-四聯(lián)體，誘導金

3、納米粒子聚集，導致體系的共振光散射大大增強，體系最大RLS峰位于495.0nm，且腺苷濃度為6.0×10-9～1.15×10-7mol·L-1時，與體系共振光散射強度變化值呈良好的線性關系。該方法檢測腺苷的檢出限為1.8×10-9mol·L-1，人工尿樣分析的相對標準偏差分別為3.55％，4.37%，5.85%，加標回收率分別為96.3%，98.8%，103.4%（n=6）。該方法簡便快速，靈敏度高，選擇性好，準確度高，用于肺癌病人尿中

4、腺苷的測定，結果與高效液相色譜法一致。
　　本文第三章基于核酸適體結構開關偶聯(lián)6-羧基熒光素和金納米粒子作為熒光能量供受體對的熒光共振能量轉移，建立了腺苷檢測新方法。在20mmol·L-1 Tris-HCl（pH=7.4）緩沖液中，腺苷加入后的濃度為2.0×10-8～1.8×10-6mol·L-1時，腺苷濃度與體系DF呈良好的線性關系。該方法測定腺苷的檢出限為6.0×10-9mol·L-1。分別把腺苷標準溶液加入選定的干擾物質混合