上轉發(fā)光免疫層析法檢測乙肝病毒外膜大蛋白在不同類型慢性肝病中的臨床意義.pdf

1、目的：建立上轉發(fā)光免疫層析技術(UPT-LF)檢測乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)的方法，和酶聯(lián)免疫吸附測定(ELISA)法進行比較，并分析此法用于乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)在慢性乙型肝炎(CHB)、乙肝后肝硬化(LC)、乙肝原發(fā)性肝癌(PHCC)患者血清中水平變化及血清檢測的臨床價值。
　　方法：利用上轉發(fā)光材料UCP作為示蹤劑結合免疫層析技術組裝乙肝病毒外膜大蛋白定量試紙條。利用基于上轉發(fā)光法的免疫層析檢測技術(UP

2、T)檢測260例慢性乙型肝炎、190例乙肝肝硬化及45例乙肝原發(fā)性肝癌患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白（HBV-LP）的含量;化學發(fā)光法檢測乙肝E抗原（HBeAg）含量;實時熒光定量PCR法檢測乙肝病毒核酸（HBV DNA）。另外選取60例健康體檢者作為對照組，同時用上轉發(fā)光免疫層析法和ELISA法檢測其血清HBV-LP的含量。分析乙肝病毒外膜大蛋白(HBV-LP)檢測在不同疾病狀態(tài)的診斷中的意義。
　　結果：⑴成功建立基于上轉發(fā)光免

3、疫層析技術定量檢測HBV-LP的試紙條;產(chǎn)品相關性能檢測結果良好，最低檢測限約為0.1 U/ml，cut-off值約為1.0 U/ml，批內(nèi)與批間CV％均小于15％。⑵60例健康體檢人員血清經(jīng)UPT-LF法檢測，HBV-LP含量均小于1U/ml，特異性為100％，ELISA法檢測結果顯示59例血清標本HBV-LP陰性，另一例陽性，特異性為98.3％。⑶495例乙肝患者血清標本同時采用UPT-LF法與ELISA法檢測HBV-LP，兩種方法

4、檢測總符合率為91.7％，UPT法檢測HBV-LP陽性率為58.5％，ELISA法檢測HBV-LP陽性率為59.5％。⑷HBV-LP陽性結果濃度水平CHB組主要以＞40 U/ml的高濃度為主，LC組和PHCC組主要集中在＜10 U/ml的低濃度范圍內(nèi)。⑸HBeAg、 HBV DNA和HBV-LP的陽性率均表現(xiàn)為CHB組＞LC組＞PHC組，HBeAg和HBV DNA在LC和PHCC患者中的陽性率均明顯低于CHB患者，差異有統(tǒng)計學意義(P＜