尼氟滅酸對高肺血流肺動(dòng)脈高壓大鼠肺動(dòng)脈平滑肌中TMEM16A作用的研究.pdf

1、目的:研究尼氟滅酸(NFA)對高肺血流性肺動(dòng)脈高壓大鼠肺動(dòng)脈平滑肌中TMEM16A基因及蛋白表達(dá)的影響及部分可能的作用機(jī)制。
　　方法:40只雌雄不分的SD大鼠，180～230g，隨機(jī)分為4組:(1)正常組(Normal group):10只，不予任何手術(shù)或藥物處理;(2)假手術(shù)組(Shamgroup):10只，于開腹手術(shù)后顯露腹主動(dòng)脈及下腔靜脈10～20min，但不行分流手術(shù);(3)模型組(Model group)又稱分流組:1

2、0只。采用腹主動(dòng)脈-下腔靜脈造瘺分流法建立血流左向右分流致高肺血流性肺動(dòng)脈高壓模型;(4)干預(yù)組（NFA group）:10只，在建立了分流模型后，以鈣激活性氯離子通道(CaCC)抑制劑NFA對模型大鼠進(jìn)行每日灌胃處理。術(shù)后各組大鼠在相同條件下飼養(yǎng)11周，對各組大鼠肺動(dòng)脈平均壓力（mPAP）采用右心導(dǎo)管法測定，通過血管環(huán)的形式對其肺動(dòng)脈血管張力進(jìn)行測量，無菌條件下取材肺動(dòng)脈組織，采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-time RT PCR)

3、檢測肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中TMEM16A的mRNA表達(dá)、Western-Blot檢測其中TMEM16A的蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:(1)各組大鼠mPAP測定結(jié)果:與假手術(shù)組相比，正常組大鼠mPAP與之差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);而模型組mPAP升高，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001);干預(yù)組mPAP升高，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。干預(yù)組與模型組大鼠兩組間mPAP作對比，干預(yù)組較模型組下降，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.0

4、01)。
　　(2)模型組大鼠肺動(dòng)脈環(huán)收縮百分比均高于正常組、假手術(shù)組及干預(yù)組，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01），其中正常組與假手術(shù)組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，干預(yù)組較正常組和假手術(shù)組均升高，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P均＜0.01）。
　　(3)TMEM16A的mRNA在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)，相比正常組與假手術(shù)組大鼠兩組表達(dá)無差異(P＞0.05)，模型組和干預(yù)組PASMCs中TMEM16A的mRNA表達(dá)都有所

5、升高（P均＜0.001），但模型組表達(dá)升高較干預(yù)組更顯著(P＜0.001)。
　　(4)TMEM16A蛋白在大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞中的表達(dá)水平，模型組與干預(yù)組比較于正常組和假手術(shù)組有顯著升高，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均＜0.001)，而正常組和假手術(shù)組相較，差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，模型組與干預(yù)組對比，干預(yù)組表達(dá)水平有所降低，差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P≤0.003)。
　　結(jié)論:(1)高肺血流肺動(dòng)脈高壓大鼠肺動(dòng)脈張力上升，其