肺動脈平滑肌的SOCC在新型肺動脈高壓大鼠模型發(fā)病過程中的作用.pdf

1、目的：采用左肺葉切除（pneumonectomy，PE）復(fù)合皮下注射野百合堿(monocrotaline，MCT)誘發(fā)肺高壓大鼠的新模型，研究Ca2+池操縱性鈣通道(store-operated Ca2+channels，SOCC)在PH發(fā)病過程中的作用，為PH的臨床治療尋找新的靶點。
　　方法：將SD大鼠切除左側(cè)肺葉，待自主呼吸恢復(fù)后拔除氣管導(dǎo)管。1周以后一次性腹腔注射2％MCT(50 mg/kg)，飼養(yǎng)3wk，構(gòu)建左肺切除復(fù)合

2、MCT誘導(dǎo)的慢性肺高壓大鼠模型，通過測定平均右心室內(nèi)壓（mean right ventricular pressure，mRVP）；右心重量指數(shù)（right ventricular mass index，RVMI）；以及病理切片HE染色觀察肺動脈平滑肌增生情況鑒定PH大鼠模型。采用real-time RT-PCR方法檢測目的基因TRPC1 mRNA表達；進而用環(huán)匹阿尼酸（cyclopiazonic acid，CPA）作為SOCC激動劑，

3、通過檢測大鼠肺動脈環(huán)（pulmonary arteries，PAs）收縮效應(yīng)以及大鼠肺動脈平滑肌細胞（pulmonary artery smooth muscle cells，PASMCs）胞漿游離Ca2+濃度（[Ca2+]i）變化來檢測SOCE功能的變化；同時觀察縮血管因子內(nèi)皮素-1（endothelin-1，ET-1）誘導(dǎo)的血管張力變化，以及釓離子（gadolinium，Gd3+）對該效應(yīng)的舒張作用，評價其病理生理學(xué)意義。
　

4、　結(jié)果：①成功建立新型PE+MCT誘導(dǎo)PH大鼠模型：PE組及PE+MCT組顯著增加了mRVP、RVMI(P<0.01)，且PE+MCT組增高更為顯著，提示PE及PE+MCT均可誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生顯著PH及右心室肥大；病理切片HE染色可見肺小動脈中膜平滑肌顯著增生，動脈內(nèi)徑減小，PE+MCT組肺動脈平滑肌增生更為顯著，提示PE+MCT可誘發(fā)大鼠肺血管重構(gòu)；②目的基因表達顯著增加：PE組及 PE+MCT組上調(diào)了規(guī)范性瞬時感受器電位通道蛋白1(TR

5、PC1)的mRNA表達。③SOCE功能增強：PE+MCT組大鼠由SOCC激動劑CPA誘發(fā)的肺動脈平滑肌細胞(PASMCs)的胞內(nèi)鈣瞬變顯著高于CON組(P<0.01)，由此而引發(fā)的肺血管收縮也顯著高于CON組(P<0.01)。④病理生理學(xué)效應(yīng)增強：PE組及PE+MCT組10 nM ET-1引起的血管收縮效應(yīng)顯著高于CON組，且3nM Gd3+舒張ET-1預(yù)收縮PAs效應(yīng)顯著增強(P<0.05)，提示SOCE在PE+MCT大鼠PAs的ET