內(nèi)毒素誘導(dǎo)Wistar大鼠DIC模型建立及尿激酶干預(yù)作用的探討.pdf

1、研究目的： 1．建立內(nèi)毒素誘導(dǎo)Wistar大鼠DIC模型。 2．探討尿激酶對(duì)內(nèi)毒素誘導(dǎo)Wistar大鼠DIC模型干預(yù)的意義。 對(duì)象與方法：選用Wistar大鼠72只，雌性，體重160～170g，周齡6～7周。 1、內(nèi)毒素誘導(dǎo)Wistar大鼠DIC模型建立：符合試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的Wistar大鼠隨機(jī)分配入實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，戊巴比妥(30mg/kg)經(jīng)腹腔麻醉后，尾靜脈持續(xù)輸注生理鹽水2.5ml/h或內(nèi)毒素3m

2、g/kg/h，分別于1、2、4小時(shí)經(jīng)腹腔靜脈取血，以EDTA和3.8％枸櫞酸鈉抗凝，行PT、APTT、FIB、ALT、Cr、PAI-1和D-二聚體檢測及顯微鏡下計(jì)數(shù)血小板。活體取大鼠腎、肝、肺標(biāo)本，10％甲醛固定，經(jīng)包埋、切片后，行HE、MSB及PTAH染色。 2、尿激酶干預(yù)方法：符合試驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的Wistar大鼠隨機(jī)分配入實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，分別經(jīng)尾靜脈輸入生理鹽水(NS組)、尿激酶(UK組)、內(nèi)毒素(LPS組)及尿激酶+內(nèi)毒素(U

3、K+LPS組)×4h。麻醉、腹腔靜脈取血、取肝、腎、肺標(biāo)本同前。 結(jié)果： 1．內(nèi)毒素誘導(dǎo)Wistar大鼠DIC造模結(jié)果：Wistar大鼠按LPS(3mg/kg/h)濃度分別經(jīng)尾靜脈輸入1小時(shí)、2小時(shí)、4小時(shí)后，可見血漿PT、APTT逐漸延長，PLT、FIB逐漸降低，ALT、Cr逐漸升高，均在2小時(shí)達(dá)高峰，4小時(shí)表現(xiàn)為平臺(tái)狀態(tài)。纖溶指標(biāo)PAI-1、D-dimer開始上升明顯，隨著PAI-1進(jìn)一步升高，D-dimer下降

4、。肝、腎、肺病理切片顯示細(xì)胞水腫，微血管中可見纖維蛋白微血栓形成，此改變?cè)?小時(shí)較輕微，2小時(shí)及4小時(shí)最明顯，尚伴有灶性出血，纖維蛋白微血栓形成在腎小球易見。提示此模型在LPS輸入1小時(shí)時(shí)開始出現(xiàn)DIC的跡象，隨著輸注時(shí)間的延長，DIC的表現(xiàn)越趨明顯。 2．尿激酶干預(yù)試驗(yàn)顯示：(1)尿激酶干預(yù)后PT、APTT、值雖未回復(fù)至NS對(duì)照組水平，但較LPS組明顯縮短，而PLT、FIB的改變不大；PAI-1濃度減低，而D-dimer含量

5、明顯增高。(2)尿激酶干預(yù)組Cr、ALT明顯降低，肝、腎、肺病理切片示：組織損傷較LPS組減輕，腎小球纖維蛋白形成率明顯減少。(3)實(shí)驗(yàn)過程中LPS組實(shí)驗(yàn)鼠死亡只數(shù)為4/10只，主要死于呼吸衰竭。而尿激酶干預(yù)組為1/10只。 結(jié)論： (1)我們首次在本院血液病研究室用內(nèi)毒素(3mg/kg/h)誘導(dǎo)Wistar大鼠建立DIC模型成功。 (2)本研究顯示尿激酶對(duì)改善LPS誘導(dǎo)Wistar大鼠DIC模型出現(xiàn)的凝血