肝毒清顆粒對內(nèi)毒素血癥肝損傷大鼠蛋白質(zhì)譜表達的干預(yù)作用.pdf

1、目的:探討肝毒清顆粒對內(nèi)毒素血癥肝損傷大鼠蛋白質(zhì)譜表達的干預(yù)作用。
　　 方法:(1)將SD大鼠隨機分為正常組、模型組、中藥組、中藥治療組4個組,每組均為10只。(2)模型組:模型組大鼠連續(xù)7天,每天1次用(0.2ml／10g)蒸餾水灌胃。脂多糖(LPS)(10mg／Kg)于末次灌胃1h后腹腔注射。實驗期間,所有動物正常飲水,普通飼料喂養(yǎng),禁食12h后腹腔注射脂多糖及腹主動脈取血。1％戊巴比妥鈉(30mg／Kg)于腹腔注射脂多糖

2、3h后,腹腔注射以麻醉動物,開腹前酒精消毒皮膚,腹主動脈采血,所有血液放入4℃冰箱保存。差異表達的血清蛋白質(zhì)譜用表面增強激光解析電離飛行時間質(zhì)譜技術(shù)(SELDI-TOF—MS技術(shù))檢測。肝功酶學(xué)指標(biāo)用全自動酶標(biāo)儀檢測。內(nèi)毒素濃度用革蘭陰性菌脂多糖檢測試劑盒(光度法)檢測。取肝組織1.5cm×1.0cm×0.5cm,10％甲醛固定,HE染色,常規(guī)病理切片,光鏡下觀察肝組織病理變化。(3)中藥組、中藥治療組:成人中藥用量為1.58g生藥／K

3、g／天,根據(jù)體表面積公式,大鼠常規(guī)用量為10.20g生藥／Kg／天。中藥組大鼠連續(xù)7天,每天1次用0.2ml／10g肝毒清顆粒灌胃,并用等量的蒸餾水于末次灌胃1小時后腹腔注射；中藥治療組連續(xù)7天,每天1次,用0.2ml／10g肝毒清顆粒灌胃,脂多糖(LPS)(10mg／Kg)于末次灌胃1h后腹腔注射,余方法同模型組。(4)正常組:正常組大鼠連續(xù)7天,每天1次,用0.2ml／10g的蒸餾水灌胃,并用等量的蒸餾水于末次灌胃1小時后腹腔注射,

4、余方法同模型組。
　　 結(jié)果:(1)各組內(nèi)毒素水平:與模型組比較,中藥治療組的血漿內(nèi)毒素水平降低,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。(2)肝臟生化檢查結(jié)果:與模型組比較:中藥治療組的血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平降低,有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)。(3)蛋白質(zhì)芯片共捕捉到110個差異表達蛋白峰,其中,有15個差異表達蛋白峰有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。相對質(zhì)荷比為9193.117道爾頓的蛋白峰在空白組和模型組之間

5、有差異表達；相對質(zhì)荷比為2844.562道爾頓的蛋白峰在空白組和中藥組之間有差異表達；相對質(zhì)荷比為3827.878道爾頓的蛋白峰在模型組和中藥治療組之間有差異表達。(4)光學(xué)顯微鏡下觀察:①正常組:肝細胞正常,核膜清楚。②模型組:肝組織絕大部分被破壞,肝細胞變性壞死、出血,無明顯再生現(xiàn)象。③中藥組同正常病理切片。④中藥治療組:肝組織有少量破壞,肝細胞無明顯變性壞死和出血,核膜較清楚。
　　 結(jié)論:(1)肝毒清顆粒能降低內(nèi)毒素血癥