銀杏酚單體的分離鑒定及分析方法建立.pdf

1、銀杏酸和銀杏酚是烷基酚酸類化合物，主要存在于銀杏的葉、果和外種皮中。銀杏酸的羧基不穩(wěn)定，受熱易脫去生成銀杏酚。而銀杏酚具有良好的抗腫瘤活性和熱穩(wěn)定性。作者就銀杏酸的微波降解，六種銀杏酚單體的分離、鑒定及抗腫瘤活性，銀杏酸和銀杏酚分析方法的建立進行了研究。主要研究工作如：
　?。?）研究微波處理對銀杏酸降解反應的影響，比較堿催化在銀杏酸微波降解中的作用。銀杏酸固體分別與Ca(OH)2和KOH粉末混合，在700W功率下微波處理，以未加

2、堿組為對照。結果表明，未加堿處理組微波作用30min，銀杏酸沒有發(fā)生顯著降解；加Ca(OH)2處理組微波作用25min就實現(xiàn)完全降解；而加KOH處理組微波作用10 min就實現(xiàn)完全降解。降解產物采用HPLC-ESI-MS分析，證實銀杏酸微波降解主要產物為銀杏酚，同時也產生了銀杏酚的二聚物。
　?。?）研究由銀杏酚同系物分離制備銀杏酚單體的高效液相制備色譜條件。優(yōu)化的色譜條件：色譜柱 Welch Ultimate AQ-C18；流動

3、相為甲醇-水（86:14）；流速24mL/min；紫外檢測波長為280nm；進樣量200mg。在上述制備條件下，分離得到了六個銀杏酚單體，并首次實現(xiàn)了銀杏酚C17:1的兩個異構體的分離。采用UV、IR、1H-NMR、13C-NMR波譜分析和GC-MS質譜分析對純化得到的六種銀杏酚單體進行結構表征，六個單體化合物被依次鑒定為：3-十三碳烷基苯酚，3-[8(Z)]十五碳烯基苯酚，3-[9(Z),12(Z)]十七碳二烯基苯酚，3-十五碳烷基苯

4、酚，3-[10(Z)]十七碳烯基苯和3-[12(Z)]十七碳烯基苯酚。
　?。?）采用 MTT法比較六種銀杏酚單體的抗腫瘤活性，結果表明，六種銀杏酚單體對肝癌 HepG2和胃癌 HGC細胞具有很強的細胞毒性，其中側鏈不飽和的單體比側鏈飽和的單體具有更強的細胞抑制作用。在四個側鏈不飽和的銀杏酚單體（C15:1-Δ8，C17:2-Δ9,12，C17:1-Δ10和C17:1-Δ12）中，銀杏酚C15:1-Δ8具有最強的細胞毒性；對銀杏酚

5、C17:1的兩個異構體而言，側鏈雙鍵在Δ10位的單體比在Δ12位的單體顯示出更強的抗腫瘤作用；銀杏酚C17:2的抗腫瘤效果與銀杏酚C17:1的相近。六個銀杏酚單體的抗腫瘤活性大小依次為C15:1-Δ8>C17:1-Δ10>C17:2-Δ9,12>C17:1-Δ12>C15:0>C13:0。
　　（4）建立HPLC-DAD-FLD法同時檢測銀杏酸和銀杏酚的分析方法。DAD和FLD的檢測條件是：銀杏酸的紫外檢測波長為310nm；銀杏酚